王美英

    三代头孢菌素如头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶和单环酰胺类抗生素如氨曲南在临床上广泛应用，导致对这类抗生素耐药的细菌不断增多，其主要机制是细菌产生了能水解氧亚氨基β-内酰胺抗生素的超广谱 β-内酰胺酶(extended-epectrum βlactamases，ESBLs)。产ESBLs菌常具多重耐药性，易导致医院内的暴发流行，且流行状况及耐药性存在地区差别，并对三代头孢菌素表现敏感而误导治疗，故被认为是革兰阴性菌中最危险的耐药形式。因此，了解我市儿科患者分离的肠杆菌科细菌中ESBLs的流行和分布情况，以及产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因型别及最佳检测底物及耐药性特点，从而防止产

    ESBLs株的区域性流行，指导临床治疗，以免延误病情和造成浪费。

    1 材料与方法

    1.1 试验材料

    1.1.1 菌株:2006年1月至2009年12月，河北省保定市儿童医院患者标本中分离出的耐药性肠杆菌科细菌。ESBLs敏感菌标准菌株大肠埃希菌ATCC 25922，ESBLs检测质控菌株肺炎克雷伯菌ATCC 700603(产超广谱β-内酰胺酶菌株)

    1.1.2 试剂:革兰阴性杆菌培养基:中国兰琼脂平板(英国Oxoid公司)。药敏M-H琼脂培养基(英国Oxoid公司)。营养肉汤(英国Oxoid公司)。

    1.1.3 主要仪器设备及器械:全自动血培养仪(法国生物梅里埃公司);VITEK 2全自动微生物鉴定仪(法国生物梅里埃公司);PCR扩增仪(杭州博日科技有限公司);水平凝胶电泳槽(日本ATTO公司) ......