桂皮醛诱导K562细胞分化增强Mel18表达
兔抗人,癌基因,1材料与方法,2结果,3讨论
刘黎琼 刘 泽林 王 欣 王 淡瑜 崔 海燕 金梦迪恶性肿瘤的诱导分化治疗已成为目前肿瘤生物学和肿瘤治疗学的前沿领域和研究热点,尤其是中药提取物的诱导分化研究是热点中的热点。桂皮醛是食用香料肉桂提取物的主要活性成分,具有安全无毒特点。桂皮醛可对多种恶性肿瘤调亡发挥抑制增殖、诱导凋亡的效应,我们的前期研究也显示桂皮醛可诱导慢性粒细胞性白血病细胞株K562凋亡,但尚无桂皮醛诱导分化效应研究的报道[1-3]。本实验观察桂皮醛诱导K562细胞分化改变及探讨相关机制,以进一步研究桂皮醛抗肿瘤的机制。
1 材料与方法
1.1 实验对象与主要试剂 人慢性髓细胞白血病细胞株K562来自华中科技大学同济医学院协和医院干细胞研究与应用中心保存。桂皮醛(分子式C9H8O,分子量132.16,纯度大于95%,购自上海国药集团化学试剂有限公司),用二甲基亚砜配成贮存液。藻红蛋白(Phycoerythrin,PE)标记的抗人CD11b单克隆抗体(CD11b-PE)、异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)标记的抗人CD14抗体(CD14-FITC)购自美国 BD(Becton,Dickinson and Company)公司。兔抗人Mel18多克隆抗体、FITC标记的羊抗兔IgG多克隆抗体(IgG-FITC)购自Santa Cruz公司。兔抗人c-Myc多克隆抗体、兔抗人GAPDH多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG购自Cell signaling公司。
1.2 细胞培养与分组 K562细胞用RMPI 1640完全培养液在37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养,每2~3天传代一次,取对数生长期细胞用于实验(要求细胞活性>98%) ......
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