李保红 崔澂 高峰 王润田 郑文广 张征峥

    结直肠癌是目前世界上发病率和病死率较高的恶性肿瘤之一。通过分泌转化生长因子(transforming growth factor，TGF)-β1、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、IL-4、IL-6、IL-10、PGE2 等免疫抑制分子抑制免疫功能从而逃避免疫监视，是结直肠癌发生发展的重要机制[1-3]。目前应用于结直肠癌的放、化疗药物多具有一定的不良反应，尤其是对免疫功能已显低下的患者，可致全身及肿瘤局部免疫功能进一步损伤。抗瘤中药制剂具有低毒、不对机体免疫系统造成损伤的特点，恰可弥补放、化疗在临床使用中的不足[4，5]。对其影响肿瘤免疫抑制分子分泌的研究，除本课题组外笔者尚未见报道。

    1 材料与方法

    1.1 肿瘤细胞株 小鼠结直肠癌细胞株Colon 26，为中国人民解放军白求恩军医学院训练部冻存。

    1.2 主要试剂及仪器 RPMI-1640为GIBCO公司产品，每升完全培养液(Complete Medium，CM)中含小牛血清0.1 L、青霉素100000 U、链霉素100 mg;小牛血清由河北医科大学科技总公司提供，青霉素及链霉素为华北制药集团产品;MTT及DMSO 为美国 Sigma公司产品。TGF-β1、VEGF、IL-4、IL-6、IL-10 酶联免疫检测试剂盒均为美国R＆D公司产品;PGE2检测试剂盒为上海阳光生物制品公司产品。Mk353型酶联免疫检测仪为芬兰ThermoLabsystems产品。

    6种中药制剂:亚砷酸注射液为哈尔滨伊达药业有限公司产品，批号20040201，10 mg/10 ml，主要成分为三氧化二砷(As2O3)。盐酸川芎嗪(LHC)注射液为北京市永康药业有限公司产品，国药准字H 11020960，40 mg/2 ml。黄芪(AMB)注射液为成都地奥九泓制药厂产品，国药准字Z 51021776，20 g/10 ml。苦参素注射液为天津市生物化学制药厂产品，国药准字 H 12020506，0.2 g/2 ml，主要成分为氧化苦参碱(MOX)。猪苓多糖(PUPS)注射液为江苏正大天晴药业股份有限公司产品，ZZ-5458苏卫药准字(1999)第185701号，20 mg/2 ml。青蒿琥酯(ART)注射液为桂林南药股份有限公司产品，国药准字H 10930195，60 mg/瓶，以1 ml 5%NaHCO3溶解。所有中药制剂实验前均用CM稀释至所需浓度。

    1.3 中药制剂作用浓度的确定 取对数生长期Colon 26细胞加入96孔板 ......