甲醛足底致痛大鼠脊髓后角神经元内蛋白激酶C活性改变对一氧化氮合酶的影响
鞘内,阳性细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
吕兴业热痛觉过敏的产生与一氧化氮(nitric oxide,NO)生成有关。虽然痛觉过敏机制尚未搞清,但目前认为在伤害性因素刺激下,脊髓伤害性信息传入神经元释放性氨基酸(excitatory amino acids,EAAs),激活 N-甲基-D-天冬氨酸(CN-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体。NMDA受体激活一方面可引起蛋白激酶(protein kinasec,PKC)激活;另一方面,NMDA受体的激活,也可引起一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的激活并生成NO。但目前尚无直接证据表明NMDA受体激活后,PKC激活是否影响NOS的活性,即NOS除受NMDA受体直接调控外,是否也受到PKC活性的调控。本实验旨在观察PKC兴奋剂与抑制剂对甲醛炎性痛及痛觉过敏中脊髓后角诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性的影响,以阐明疼痛及痛觉过敏时脊髓后角神经元内PKC活性是否影响NO的生成。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组 健康纯种Sprague-Dawley(SD)大鼠54只,由河北医科大学实验动物中心提供,体重260~280 g,雌雄不限,分9组,每组6只。(1)正常组:不加任何处理,取材固定观察;(2)甲醛12 h组:右后掌注射甲醛后12 h取材观察;(3)甲醛24 h组:右后掌注射甲醛后24 h取材观察;(4)甲醛12 h加0.9%氯化钠溶液组:于右后掌注射甲醛前30 min鞘内注射0.9%氯化钠溶液1次,6 h再重复注射1次,注射甲醛后12 h取材观察;(5)甲醛24 h加0.9%氯化钠溶液组:于右后掌注射甲醛前30 min鞘内注射0.9%氯化钠溶液1次,12 h再重复注射1次,注射甲醛后24 h取材观察;(6)甲醛12 h加PMA组:于右后掌注射甲醛前30 min鞘内注射佛波醇脂(Phobol-12-myristate-13-acetate,PMA)1次,6 h再重复注射1次;注射甲醛后12 h取材观察;(7)甲醛24 h加PMA组于右后掌注射甲醛前30 min鞘内注射PMA 1次,12 h再重复注射1次,注射甲醛后24 h取材观察;(8)甲醛12 h加灯盏花素乙(Chelerythrine chloride,CH)组:于右后掌注射甲醛前30 min鞘内注射CH 1次,6 h再重复注射1次,注射甲醛后12 h取材观察;(9)甲醛24 h加CH组:于右后掌注射甲醛前30 min鞘内注射CH 1次 ......
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