全反式维甲酸抑制兔颈动脉内皮损伤后内膜增殖和聚集素表达的研究
中膜,管腔,1材料与方法,2结果,3讨论
李彦飞 王爱民 郑舒 董果雄全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,atRA)是维生素A的 天然衍生物,它可通过调节多种生物活性因子的表达、阻滞细胞周期进程从而抑制血管平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)的迁移、增殖,并促进凋亡,发挥抗血管内膜增殖作用[1,2]。聚集素是一个多功能蛋白质,它具有促进细胞聚集的作用,能促进血管平滑肌细胞增殖,对内皮损伤后血管内膜增殖也有不利影响[3],本实验旨在观察血管内皮损伤后聚集素的表达情况和atRA对聚集素表达的影响,探讨atRA对血管再狭窄的作用及机制。
1 材料与方法
1.1 材料 健康新西兰雄性大白兔36只,4个月龄,体重(2.5±0.12)kg,购自青岛市动物实验中心。atRA(重庆华邦制药公司),胆固醇(上海化学制剂公司),兔抗兔聚集素,SABC试剂盒(武汉博士德公司),鼠抗兔增殖细胞核抗原[(proliferating cell nuclear antigen,PCNA(北京中杉)],ElivisionTM plus试剂盒(福州迈新),Masson三色试剂盒(福州迈新),奥林巴斯BX50显微镜,Image-Pro Plus图像分析系统。
1.2 方法
1.2.1 动物分组及模型制作:36只新西兰大白兔按体重随机分为6 组:治疗组(A、B)、对照组(A、B)、假手术组(A、B),每组6只。治疗组和对照组每天进食150 g高脂饲料,含6.0%猪油、1.5%胆固醇、92.5%基础饲料;假手术组每天喂养150 g基础饲料;均自由饮水。喂养2周后行颈动脉内膜空气干燥术,假手术组手术但不损伤内膜。治疗组术前3 d开始给予atRA 6mg·kg-1·d-1,溶于 1ml植物油中灌胃至处死,对照组、假手术组给予等量植物油灌胃。
内膜空气干燥术:经耳缘静脉注射0.25 kg/L的乌拉坦1.0 g/kg,麻醉良好后颈部脱毛消毒,取颈正中纵形切口,分离右颈总动脉2.0cm,选择无分支段,动脉夹夹闭两端,4.5 G针头平行穿刺阻断血管的两端,0.9%氯化钠溶液冲洗血管腔,向夹闭段的颈总动脉内以120ml/min速度注入空气10min ......
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