刘广智 刘金梅 王志军 郭小丽 姚玉洁

    妊娠期糖尿病是指妊娠期间首次发生或发现的糖耐量异常。研究发现，在人和多种动物胎盘和胎膜内有水通道蛋白的表达[1，2]，他们属于近年发现的一组选择性转运水的跨膜蛋白家族(称为水通道蛋白家族AQPS)的成员。本研究通过RTPCR法检测水通道蛋白8(AQP8)mRNA在妊娠期糖尿病大鼠胎膜中的表达情况，探讨糖代谢异常导致的羊水过多是否与AQP8基因的改变有关，为阐明糖代谢导致的水平衡紊乱的分子机制提供理论依据，同时也为这种因代谢异常导致的水平衡紊乱提供新的治疗思路。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 造动物模型：选取健康成年SD大鼠，雌雄兼备，体重180～220 g，由北京华阜康公司提供，采用引导图片方法确定大鼠的动情周期，将处于动情前期的雌、雄鼠按1∶1合笼，次晨检查阴道口及垫料，观察是否有阴栓存在，有阴栓者定为怀孕第1天，分开雌、雄鼠。模型鼠于妊娠第5天一次性尾静脉注射链脲菌素(STZ)35 mg/kg，注射72 h后，测空腹血糖(FGB)，稳定在13.5 mg/L以上者为糖尿病模型造模成功，共30只，做模型组。选取30只正常妊娠大鼠做对照组。

    1.1.2 标本采集：妊娠第19天于无菌条件下获取模型组和对照组大鼠胎膜组织大小1 cm×1 cm，DEPC水冲洗干净去除血液，滤纸吸去多余水分，立即放入液氮中，转运至-80℃保存。

    1.1.3 主要试剂：RNA提取试剂Trizol Reagent购自美国Invitrogen公司，逆转录酶(AMV-RT)、核糖核酸酶抑制剂(RNasin)、Dntp、Taq DNA 聚合酶(Taq DNA polymerase)、随机引物(Random primers)均购自美国 Promega公司 ......