贾静 孟令华

    乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其主要死亡原因是术后复发、转移，临床尚无可靠的方法做到早期监测。因此探讨乳腺癌复发和转移相关的生物学指标是乳腺癌基因研究和临床研究的重要课题。本研究采用免疫组化的方法检测乳腺癌组织中特异基因(BCSG1)、增殖细胞核抗原(Ki67)的表达，结合临床病理因素分析它们之间的相关性，对指导乳腺癌的治疗和预后的判断提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 收集本院2008年10月至2010年8月住院的62例女性乳腺癌患者的病理组织。组织标本以10%甲醛溶液固定24 h，常规石蜡包埋，制备4 μm厚连续切片3张，贴附于用多聚赖氨酸处理的载玻片上，60℃烤片2 h，室温保存，以备检测 BCSG1、Ki67。

    1.2 试剂 羊抗人BCSG1单克隆抗体(sc-10699)购自美国SANTA CRUZ公司，Ki67单克隆抗体(zm-0166)购自北京中杉生物技术有限公司。

    1.3 免疫组化法 石蜡切片常规脱蜡;高压煮沸2 min进行抗原热修复处理;蒸馏水洗后经磷酸盐缓冲液(PBS缓冲液)冲洗，加入一抗BCSG1、Ki67，4℃过夜孵育;PBS缓冲液冲洗3次，2 min/次，加入二抗孵育1 h;PBS缓冲液冲洗，加二氨基联苯胺(DAB)显色。蒸馏水洗后苏木素复染，自来水冲洗，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，封片。

    1.4 结果判定 BCSG1评定参考Mohsin等[1]报道的标准进行改良，主要为细胞浆出现棕黄色细颗粒为阳性细胞，少数病例可见胞核着色，采用阳性细胞比例评定结果，阳性细胞<25%为阴性(-);25% ～50%为弱阳性(+);51% ～75%为中阳性(++);>75%为强阳性(+++);-～+为低表达 ......