黄芩苷干预肺腺癌细胞前后肿瘤细胞侵袭能力的变化
小室,细胞株,1材料与方法,2结果,3讨论
王英妹 郑海峰 武铁军 李庆祥 张健黄芩苷(baicalin)是从唇形科植物黄芩中提取、分离出来的黄酮类化合物,是黄芩的主要有效成分之一,具有多种药理作用,如:抗菌、抗氧化、诱导干细胞分化等[1-3]。研究表明,黄芩苷具有抗肿瘤的作用,但对其具体的作用机制目前尚未明了[1]。肺腺癌是临床常见的恶性肿瘤之一。随着我国工业化进程,肺腺癌发病和病死率目前均居恶性肿瘤前列,对人民健康危害极大。手术和化学治疗在肺腺癌治疗中占有很重要的地位,但存在一定的局限性和不良反应。本实验探讨了baicalin对人肺腺癌细胞A549侵袭迁移的影响,并检测了与肿瘤侵袭迁移关系密切的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM)-1在用药前后表达的变化,为baicalin应用于肺腺癌的临床治疗提供一些新的理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞株:A549肺腺癌细胞株,购自中科院上海细胞研究所。
1.1.2 药物:Baicalin购自南京青泽医药公司,纯度:99.1%。
1.1.3 主要试剂:Trizol试剂为美国 Invitrogen公司产品,RTPCR试剂盒购自 Promega公司;MMP-2、MMP-9、ICAM-1、GAPDH引物由上海生工生物工程公司设计合成。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞划痕试验:将肺腺癌A549细胞株传代于玻片上,生长至100%汇合后,用无菌吸头在玻片上划痕。磷酸盐缓冲液(PBS)洗净被刮下的细胞,每孔加纤连蛋白后分别加入0、0.5、1、2、4、8 mg/L baicalin,对照组加等量 0.5% 二甲基亚砜(DMSO),孵育48 h,取出玻片,低倍视野下观察细胞伤口愈合情况。随机选取5个视野,计数迁移细胞的数量 ......
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