张素芝 杜丽荣 韩宏伟 李国正 韩省华 刘效群 赵邦荣 张亦心

    反复自然流产(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指连续发生2次或2次以上的自然流产。其病因复杂，在发病患者中有60%～70%是不明原因的。滋养细胞的分化、浸润行为十分复杂，但调节极为精细，时间仅限于早孕期，滋养细胞具有与肿瘤细胞相似的浸润性生长的生物学特性，早孕期滋养细胞迅速增生并侵蚀子宫内膜。生存素(Survivin)是一类结构独特的哺乳类动物凋亡抑制蛋白，具有抑制细胞凋亡和调节细胞有丝分裂的双重功能，可表达于大多数肿瘤组织及多种转化细胞。近来研究发现，Survivin基因的上游启动片段中存在信号传导子和转录活化子3(STAT3)的反应元件，STAT3可能从上位调节Survivin的表达[1];而血管内皮生长因子(VEGF)亦可以通过激活Akt/PKB信号途径，提高Survivin基因在细胞中的表达。本研究从滋养层细胞浸润能力的调控角度，探讨RSA患者孕早期妊娠组织中Survivin、VEGF及Stat3的表达及可能调控途径。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择2007年1至6月石家庄市妇幼保健院妇科门诊就诊的20～35岁RSA患者40例(RSA组)。病例选择条件:发生过2次或2次以上自然流产;孕周12周;流产前B超证实胚胎停育;夫妇外周染色体核型正常，无家族遗传病史;血三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)和促甲状腺激素(TSH)检查无甲状腺功能异常、黄体功能不全、多囊卵巢综合症、高泌乳素血症等内分泌疾病;排除子宫畸形、Rh血型不合及TORCH(弓形虫抗体、风疹病毒抗体、巨细胞病毒抗体、柯萨奇病毒抗体和生殖器疱疹病毒抗体)检测异常。同期随机选择无不良孕产史，有正常足月分娩史或无生育史的正常同年龄段、孕周相同要求人工流产的正常早孕女性20例做对照(对照组)。

    1.2 研究方法

    1.2.1 主要试剂与仪器:兔抗人VEGF单克隆抗体、兔抗人Survivin多克隆抗体(北京中杉金桥生物技术有限公司)，TNF-α酶联免疫分析(ELISA)试剂盒(北京博奥森生物公司)，联苯二胺(DAB)底物显色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)。流式细胞仪Epics-XLⅡ型(Beckman Coulter，美国)，全自动酶联免疫检测仪Bio-Rad 255型(Bio-Rad，美国)。

    1.2.2 组织免疫化学(SP法):10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，切片厚4 μm，经逐级酒精水化至蒸馏水，微波抗原修复 ......