苦参素对肝星状细胞胶原合成能力的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
张建荣 刘志刚 李丽华近年来关于苦参素的实验研究很多,大多是在抗病毒方面[1,2]。大量临床实践证实,苦参素可以阻止甚至逆转肝脏纤维化,但其作用机制及调节途径尚不明确。肝纤维化以肝脏细胞外基质(ECM)大量增生沉积为特征,是各种慢性肝病所共有的病理特点,肝星状细胞(HSC)是胶原合成和降解的关键细胞,苦参素可能是通过抑制HSC总胶原及Ⅰ型胶原的合成,从而产生抗肝脏纤维化作用的。
1 材料与方法
1.1 试剂及主要仪器 苦参素注射液为市售产品,由上海第一生化药业公司生产。BMPI-1640培养基为美国Gibeo公司产品;无支原体胎牛血清购自杭州四季青生物制品公司;纤维连接蛋白(FN)由上海医科大学细胞室提取并纯化;3H-脯氨酸(3H-Pro)试剂盒购自中国原子能研究所;主要仪器有超净工作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜、LS6500液闪仪。
1.2 细胞系 HSC系CFSC由美国Greenwel教授建系并惠赠,其表型为活化的HSC。
1.3 方法
1.3.1 细胞培养:细胞置于含8%胎牛血清、100 U/ml青霉素、100 μg/ml链霉素、4 mmol/L 谷氨酰胺及1 mol/L HEPES 的BPMI1640培养液中 ......
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