陈霞 刘蕾 牛国超 梁育飞 张晓岚

    肝硬化被视为原发性肝癌(HCC)的一种癌前疾病。肝癌的筛查方法包括血清甲胎蛋白(AFP)检测、B超及放射学检查等，但是AFP检测对肝癌诊断的阳性率差别很大。CD105是一种增生相关内皮细胞的细胞膜抗原。CD105参与了血管生成的某些过程，因此可以将CD105作为肿瘤新生血管标记物。CD105参与血管生成，是新生血管的标志，因此，可以预见CD105在恶性肿瘤的诊断、治疗和预后中发挥重要的作用。HCC患者外周血CD105阳性细胞的测定及在预测HCC的价值笔者尚未见报道。本研究通过检测外周血CD105阳性细胞和血清AFP在肝硬化及HCC患者的表达水平，探讨HCC患者与肝硬化患者及正常对照间外周血CD105阳性细胞表达的差异及其意义，判定CD105在肝硬化肝癌早期诊断中的价值。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    1.1.1 纳入标准:①肝硬化病例均符合2000年9月西安中华医学会传染病与寄生虫病学会分会、肝炎后肝硬化诊断标准;②HCC患者符合2001年9月第八届全国肝癌学术会议通过的原发性肝癌的临床诊断与分期标准;③临床资料齐全，包括肝功能、凝血常规检测，B超或CT影像学检查。

    1.1.2 排除标准:①合并其他部位肿瘤;②风湿免疫性疾病[1];③妊娠女性;④心肌梗死急性期[1]。

    1.1.3 病例资料 选取沧州市中心医院住院肝硬化患者60例为肝硬化组，男44例，女16例;平均年龄(55±12)岁。HCC患者40例为HCC组，男30例，女10例;平均年龄(54±8)岁。另外，选取健康志愿者30例作为正常对照组，男14例，女16例;平均年龄(59±10)岁。

    1.2 方法

    1.2.1 标本采集:清晨空腹抽血后，样本分送CD105和AFP检测。

    1.2.2 CD105 测定:抽取抗凝静脉全血 1 ml，取其中 100 μl全血置于一试管中，加入 20 μlγ1 对照液，后加入 20 μl CD45;另取一试管 100 μl全血，加入 20 μl CD105，再加入 20 μl CD45，随后2管避光放置20 min，各加入溶血素1 ml，再避光放置10 min，以1500 r/min的速度离心5 min，弃上清液，各加缓冲液2 ml，同一速度再次离心5 min，弃上清液，再加入400 μl缓冲液后上机，用流式细胞仪检测，以Cell Quest软件获取分析数据，定量分析每管样品中10 000个细胞，以CD105+细胞为阳性细胞，收集数据 ......