黄秀英 唐福兴 李凤玲 齐磊岩 张颖 张素华

    乳腺癌是危害女性健康最常见的恶性肿瘤之一，远处转移是危及患者生命的主要原因。P-选择素是细胞黏附分子选择素家族中的重要成员，P-选择素在肿瘤的转移过程中发挥了极为重要的作用。CD44是近年来研究较多的细胞表面黏附分子，是细胞与细胞、细胞与ECM相互识别和作用的分子基础[1]。虽然 P-选择素基因的高表达、CD44基因的变异型CD44V6的出现提示了恶性肿瘤转移的倾向。但两项指标在乳腺癌中的表达及其相互作用关系的研究笔者还鲜见报道。

    1 材料与方法

    1.1 材料 收集保定市第四医院病理科2000年1月至2010年5月手术切除的蜡块存档标本93例，患者全部为女性，术前未接受任何辅助治疗，所有病例的临床及病理资料完整。切除标本由2名病理医师做出详细的病理诊断，包括病灶的大小、病理组织学类型、组织学分级、淋巴结转移等情况。其中乳腺导管内癌(DCIS)25例，乳腺浸润性导管癌(IDC)68例，其中48例伴有淋巴结转移;癌旁正常乳腺组织17例(取自距离乳腺癌组织边缘5 cm以上)作为对照组。

    1.2 病理检查 所有病理标本均经4%的甲醛液固定，石蜡包埋，常规制片，HE染色。采用S-P法进行P-选择素、CD44V6二种抗体免疫组织化学染色，浓缩型兔抗人P-选择素多克隆抗体，工作液浓度为1∶50，购自武汉博士德公司，即用型鼠抗人CD44V6单克隆抗体，为福州迈新生物技术开发有限公司产品。用已知阳性切片做阳性对照，用已知阳性的乳腺癌切片，以PBS代替一抗，作为阴性对照。胞质(P-选择素)及细胞膜(CD44V6)出现黄色至棕黄色颗粒为阳性，相应部位未出现黄色至棕黄色颗粒为阴性。

    1.3 判断标准[2，3]每张切片选取5个高倍镜视野，每个高倍视野下随机计数100个细胞，阳性表达者呈黄色至棕黄色颗粒，计算出阳性表达的细胞所占的百分比。结果判断标准:着色细胞<10%为阴性，≥10%为阳性。着色细胞为10% ～25%为(+);25% ～50%为(++);>50%者为强阳性(+++)。

    1.4 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 P-选择素、CD44V6蛋白表达 P-选择素、CD44V6蛋白阳性标记呈黄色或棕黄色颗粒，P-选择素阳性标记位于细胞浆(图1、2)，CD44V6 蛋白阳性标记位于细胞膜(图3、4)。P-选择素、CD44V6蛋白在DCIS组和IDC组的阳性率和强阳性率均明显高于对照组 ......