陈亮 戴殿禄 崔国忠 李杰 杨猛

    乳腺癌的发生及发展过程复杂，其中一个重要因素是相关癌基因的激活和抑癌基因的失活。继p53基因之后，新发现的抑癌基因PTEN是在人类肿瘤细胞中缺失和突变率最高的抑癌基因，它的缺失和突变与人类恶性肿瘤的发生普遍相关。而组织细胞凋亡失衡，细胞凋亡被抑制是肿瘤发生的另一重要机制。Livin蛋白是近些年发现的细胞内凋亡抑制蛋白，而PTEN则能起到诱导细胞凋亡的作用[1]。本课题通过检测PTEN与Livin在乳腺癌中的表达及两者的相关性，以探讨乳腺癌的发生规律，阐述这些指标对乳腺癌诊断及预后的重要意义。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2000年8月至2001年5月我院经手术治疗及病理材料齐全的50例乳腺癌患者的蜡块，患者均为女性;年龄28～78岁，平均年龄54.6岁;组织学分级:Ⅰ级15例，Ⅱ级26例，Ⅲ级9例;临床分期:Ⅰ期12例，Ⅱ期13例，Ⅲ期15例，Ⅳ期10例;腋下淋巴结转移者35例。并将收集到的20例癌旁非癌乳腺组织及10例正常乳腺组织作为对照组。

    1.2 方法 免疫组化SP法，苏木精-伊红染色。以SP免疫组化试剂盒说明书为依据进行操作。PTEN及Livin单克隆抗体均为来源于美国UCL公司。以PBS代替一抗作阴性对照，用已知PTEN、Livin阳性结肠癌组织作为阳性对照。

    1.3 结果判定 PTEN、Livin蛋白为阳性以细胞浆出现棕黄色颗粒为特征。采取以每一切片中随机选取10个高倍镜视野及每个高倍镜视野计数100个细胞的方法判定。染色强度分为三等级:浅黄染1分，中度黄染2分，强度黄染3分;阳性细胞的百分率:阳性细胞≤5%0分，5% ～25%1分，26% ～50%2分，>50%3分;将两者的结果综合分析:0分为阴性(-)，1～2为弱阳性(+)，3～4为中度阳性(++)，5～6为强阳性(+++);将PTEN和Livin蛋白的(-)、(+)组计为低表达组 ......