刘飞飞 马江红 王秀丽

    糖尿病神经痛(diabetic neuropathic pain，DNP)是糖尿病最常见的慢性并发症之一，其发病率逐年增高，约占30%，其发病机制及病理生理机制十分复杂，临床上缺乏有效的治疗药物和手段。NMDA受体是一种配体门控离子型谷氨酸受体，是兴奋性氨基酸受体系统的重要组成部分。NMDA受体是由NR1和NR2亚单位组成的异五聚体，NR1是NMDA受体复合物的功能单位，NR2是调节单位。NMDA受体不仅参与学习记忆、突触可塑性及神经发育等生理功能的调节，而且，在疼痛、神经退行性变、癫痫等病理过程中发挥重要作用。目前研究表明:外周神经损伤大鼠脊髓背角神经元上NMDA受体表达上调[1，2]，而DNP大鼠脊髓背角NMDA受体各亚基的表达变化目前还不清楚。本研究通过制备DNP大鼠模型，探讨其脊髓背角NMDA受体各亚基的表达变化，为临床治疗DNP提供新的思路。

    1 材料与方法

    1.1 动物选择及分组 清洁级雄性SD大鼠24只，由河北医科大学动物实验中心提供，4周龄，体重130～150 g，室温20～25℃，昼夜交替，自由进食水，适应环境5 d进行实验。随机分为2组:正常对照组(C组，n=9)和DNP组(D组，n=15)。

    1.2 DNP模型的制备 参考文献[3]介绍的方法，禁食12 h后腹腔注射链脲霉素(STZ，Sigma公司，美国)50 mg/kg，C组给予等容量0.9%氯化钠溶液。

    分别于注射STZ或0.9%氯化钠溶液后1、2、3周采集尾静脉血样0.5 ml，采用酶学方法测定空腹血糖浓度，ACCU-CHEK血糖分析仪由德国Roche公司提供，D组空腹血糖浓度 >16.7 mol/L为糖尿病模型制备成功;采集血样后，待大鼠安静测定机械缩足阈值(PWT)<4 g时，为糖尿病神经痛模型成功，否则剔除，予以补充。然后取L1～5节段脊髓组织，采用免疫组织化学法法测定脊髓背角NMDA受体表达水平。

    1.3 PWT的测定 参照文献[3]介绍的方法，采用“up-anddown”方法，将大鼠置于金属网上，盖以透明的有机玻璃罩。使大鼠适应环境15 min，用一系列标准化的Von Frey针垂直刺激大鼠后足底 ......