高强 刘建 石剑 贾中骄 马玉霞

    动物性食品中含有相当数量雌性激素，如雌激素和黄体酮[1]等，随着人们生活质量的提高，动物性食品的消费量也在逐渐增加，导致雌激素摄入量的增加，从而使和雌激素相关的疾病发病率增加，如男性前列腺癌和睾丸癌等;同时男性的生殖质量在全世界范围下降[2]，包括精子数量下降、隐睾和睾丸不降的上升等，也均与环境激素有关。研究表明，人类食物中雌激素的70% ～80%来自牛奶[3]，本研究以小鼠为研究对象，以了解牛奶是否对实验动物的生殖系统产生影响。

    1 材料与方法

    1.1 动物分组 22 d龄ICR小鼠(购于北京维通利华实验动物技术有限公司)96只，雌雄各半，称重编号，随机将实验动物分为4组:5 ml牛奶组，10 ml牛奶组，15 ml牛奶组，对照组。置于(24±2)℃的恒温动物房内。

    1.2 给饲方法 雌雄分笼饲养，6只一笼。4组实验动物给与基础饲料(购于河北医科大学实验动物中心)，自由摄食。同时给予清洁卫生的城市自来水，自由饮用。除基础饲料外，5 ml牛奶组，10 m l牛奶组，15 ml牛奶组分别按照 5 ml/只、10 ml/只、15 ml/只的剂量给予牛奶(市售某品牌)，给饲方式为自由饮用。

    1.3 一般观察 除每天观察小鼠行为、外观变化外，每周进行一次体重称量，经过牛奶饲喂12周后，同组别小鼠以雌雄1∶1的比例同笼，同笼时间为6 d。每天观察并记录雌鼠阴栓情况，没有观察到阴栓的雌鼠如怀孕也被记作交配成功，计算交配率。在雌雄小鼠同笼6 d后，无论是否发现阴栓，均将雄鼠和雌鼠分开，雌鼠继续喂养，观察怀孕率。交配率(%)=发现阴栓或怀孕的雌鼠数量/和雄鼠同笼的雌鼠数量×100%怀孕率(%)=怀孕的雌鼠数量/发现阴栓的雌鼠数量×100%。

    1.4 小鼠血清中激素检测 同笼结束后，雄鼠采用乙醚麻醉，股动脉取血，采用放射免疫分析法检测实验动物血清中雌二醇、雌三醇、睾酮含量。

    1.5 生殖器官观察 分离精囊腺、附睾、睾丸，采用1/10 000电子分析天平称量湿重并录入计算机分析。

    1.6 精子计数 称重后，将左侧附睾置于已加入5m l0.9%氯化钠溶液的4 cm平皿中，用眼科剪将附睾均匀剪为6段，置于37℃温箱中温育5 min ......