廉红星 赵敏 刘瑞吉

    骨肉瘤(ostcosarcoma)是最常见的骨原发性恶性肿瘤，约占所有骨肿瘤的20%，常发生于青少年，一般预后较差，且易早期发生肺转移。故骨肉瘤给患者本身、患者家庭以至社会都带来了问题，对临床诊治提出了挑战。我们采用免疫组织化学SP法，观察了Skp2、p27蛋白在骨肉瘤组织中的表达情况，并分析了两者与肿瘤的发生、发展及预后的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 35例骨肉瘤选自2000年1月至2007年12月我院病理科存档标本蜡块，其中骨肉瘤男22例，女13例，男女比例1.7∶1;年龄11～55岁，平均年龄21岁。骨肉瘤临床分期参照Enneking分期标准，Ⅲ期12例，Ⅱa 5例，Ⅱb 18例，其中肺转移者24例。全部病例均获随访。另外选取14例骨软骨瘤作为对照研究。

    1.2 实验方法 4μm厚度石蜡切片，60℃烤片3 h，SP法免疫组化染色技术参照福州迈新公司介绍的SP法步骤操作，用苏木素液复染细胞核，盐酸酒精分化，水洗返蓝，酒精梯度脱水，二甲苯透明，封固切片。用磷酸盐缓冲液(PBS)取代一抗作阴性对照，用已知的阳性切片作为阳性对照。

    1.3 结果判定 Skp2和p27蛋白免疫组织化学染色阳性反应为棕黄色和(或)棕褐色颗粒，Skp2定位于细胞核或细胞浆上，p27蛋白主要定位于细胞核上。每张切片选取10个高倍视野(×400)观察阳性细胞占细胞总数的百分比，无阳性细胞者为阴性(-)，<50%细胞着黄色或者<30%细胞着棕黄色者为阳性(+)，>50%细胞着黄色或者>30%细胞着棕黄色者为强阳性(++) ......