齐玉明 成艳梅 王振芬 李研 石彬

    卵巢恶性肿瘤在女性生殖器官恶性肿瘤中的发生率占第三位，但其病死率却居第一位。卵巢癌发病隐匿，70%的患者诊断明确时已是临床晚期。虽然，多年来外科手术操作技术、化疗方案不断改进，仍不能改善卵巢癌的生存率，5年生存率始终徘徊在30%左右。因此，寻找新的防治方法，提高患者5年的生存率是急需解决的问题。HuR是RNA结合蛋白中胚胎致死异常视觉(embryonic lethal abnormal vision，ELAV)家族的一员，ELAV家族是最紧密的RNA结合蛋白。HuR广泛存在于几乎所有的增殖细胞中，通过一定的信号途径参与细胞的增殖、分化等多种细胞行为的调节。人体内有多种细胞可分泌HuR，但在一些正常组织中表达水平很低，而在许多恶性肿瘤组织中表达水平增高，且与预后不良有关。本研究旨在检测HuR在卵巢上皮性癌的表达，对卵巢癌的防治提供实验依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择2005年6月至2010年8月，在河北医科大学第二学院妇科因卵巢上皮性癌而接受手术治疗的患者68例，术前均未接受放疗、化疗、激素及免疫治疗，术后病理组织学诊断明确，平均年龄52岁。按照WHO(1973)标准将研究对象进行组织学分类及分级，其中包括浆液性囊腺癌44例，黏液性囊腺癌18例，子宫内膜癌6例;病理分级：高分化10例，中分化30例，低分化28例;有淋巴结转移者30例，无淋巴结转移者38例;按照2000年FIGO临床分期标准，其中Ⅰ期11例，Ⅱ期16例，Ⅲ期31例，Ⅳ期10例;选择同期交界性卵巢肿瘤10例(浆液性6例和黏液性4例)和同期因其他原因行子宫+双附件切除的正常卵巢5例。

    1.2 方法

    1.2.1 标本采集：肿瘤切下后，从肿瘤生长活跃、无坏死的边缘部位取下约1 cm3大小的组织2块，放入100 mmol/L甲醛溶液固定、石蜡包埋，用于免疫组化测定。

    1.2.2 免疫组化法检测HuR的表达：标本常规脱水，石蜡包埋并制成4μm厚的连续切片，经HE染色判断切片质量后，采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法，在同一时间、同一条件下进行免疫组化检测。兔抗人多克隆HuR抗体为Santa Cruz产品，兔SP免疫组化试剂盒、DAB试剂盒均购于北京中杉金桥试剂公司。染色步骤按SP试剂盒(北京中杉金桥试剂公司)说明书进行，微波修复抗原，一抗滴度为1∶200。磷酸盐缓冲液(PBS)溶液代替一抗做阴性对照。取表达最强的部分 ......