牛会忠 王丽亚 耿建磊

    先天性巨结肠(hirschsprung’s disease，HD)亦被称为肠无神经节细胞症，是一种以反复发作并逐渐加重的腹胀、排便困难为临床表现的疾病，是新生儿低位肠梗阻最主要的原因之一，是近年来研究较多的一种常见的消化道发育畸形。其病理常常表现为：肠道末端神经节细胞发育完全缺如，HD的发病率一般认为大约为1/5 000[1]，其中男女发生比例约为4∶1，其中仍以散发型为主，但近年来发现，部分病例有典型的家族病史。家族性HD约占总发病例数中的3.6% ～7.8%[1]，河北省的先天性巨结肠的发病率较高，并有逐年增高趋势，是严重影响我省新生儿及小儿的生活质量的先天性疾病之一。本研究通过分析我院2011年以来收治的40例河北籍巨结肠患儿RET基因外显子DNA的表达变化，并讨论HD与RET基因突变的相关性。

    1 资料与方法

    1.1 标本来源及基因组DNA提取 选取我院2011年1月至2012年3月收治的HD患儿共40例，所有患儿均系河北籍，其中男31例，女9例;年龄：2 d～4岁，平均年龄1岁3个月。其中散发性34例，家族性6例，所有病例均有典型的临床表现，在术前经过钡灌肠造影、直肠肛管测压法及直肠粘膜乙酰胆碱酯酶组织化学等相关检查确诊，并经过手术病理证实，均明确诊断为HD，所有患儿无合并其他畸形。另外随机选取健康无便秘史相同年龄组河北籍儿童40例作对照组。

    所有实验对象均自愿采取静脉血1.5～2 ml，抗凝后通过盐析法提取目标基因组相关DNA片段。

    1.2 聚合酶链反应(PCR) 参照相关文献设计所需引物 ......