毕海涛 乔晓温 史为博 贾景娜 王杰 李英敏

    孤儿核受体神经生长诱导基因B-β(nerve growth factor-induced gene B-β，NGFIB-β)是孤儿核受体家族中的一员[1]，因缺乏与配体相互结合的能力又称为非配体依赖性受体。NGFIB-β主要表达在中枢神经系统，与中脑的多巴胺能神经细胞的分化有密切关系[2]。敲除NGFIB-β基因的小鼠在生后24 h内很快死亡，并有黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞的缺失，表明NGFIB-β是中脑多巴胺能神经细胞分化、迁移、成熟及存活重要的调控因子[3]。Zetterstrom 等[4]通过原位杂交报道了成熟小鼠及胚胎NGFIB-βmRNA在中枢神经系统的表达，但在中脑以外非典型多巴胺能神经细胞区域大脑皮层发育过程中NGFIB-β的蛋白表达状态及与神经细胞分化成熟的相关关系未见报道，本研究使用NGFIB-β小鼠单克隆抗体，采用免疫组化染色，观察了大鼠大脑皮层发育过程中NGFIB-β蛋白表达的动态变化及与细胞分化成熟的相关关系。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 本实验采用Wistar大鼠，由河北医科大学实验动物中心提供，清洁级，动物合格证号：1003045，在河北医科大学实验动物中心常规标准饲养。大鼠在乙醚吸入深麻醉状态下，颈椎脱髓处死。成熟大鼠5只、孕12～19 d妊娠大鼠(每天5只)、生后1～15 d的幼鼠(选择不同孕鼠出生后的个体每天5只)，处死后立刻取出大脑皮层组织。

    1.2 试剂 小鼠抗人抗大鼠NGFIB-β单克隆抗体购自英国abcam公司;免疫组化二步法试剂(LDP ......