李阳 刘巍

    循环肿瘤细胞(CTCs)起源于原发肿瘤或转移灶，存在于肿瘤患者外周血中，虽然其在外周血中所占比例很小[1]。研究发现检测CTCs不仅能反映肿瘤负荷，还能预测复发和死亡风险，多种肿瘤中CTCs阳性者生存率明显低于阴性者，在治疗期间定期检测并监测CTCs的变化，可为评价治疗方案的敏感性提供依据，并且可以作为靶向治疗的靶标，有利于开展个体化的治疗[1]。越来越多的医学工作者开始关注CTCs，本文就相关研究进行综述。

    1 CTCs

    1869年，Ashworth在1例癌症死亡患者的外周血中发现了相似肿瘤的细胞，并提出了CTCs的概念[2]。目前的肿瘤转移理论认为，随着肿瘤细胞不断增殖，部分肿瘤细胞失去相互黏附的能力，从肿瘤母体脱离，浸润周围组织，甚至进入到血液或淋巴系统中。肿瘤细胞脱落、侵袭并进入血液循环是肿瘤转移的最初阶段，并为形成肿瘤转移病灶提供了可能，因此在外周血中检测循CTCs具有重要的临床应用价值。CTCs的检测有助于早期转移肿瘤患者的诊断、监测术后患者肿瘤的复发与转移、评估抗肿瘤药物敏感性、患者预后[3]以及选择个体化的治疗策略。

    2 CTCs检测方法

    CTCs在外周血中所占比例很小[4]。现有针对 CTCs的检测技术主要包括细胞富集和鉴定两个阶段。细胞富集主要用物理、化学原理，细胞鉴定主要依靠肿瘤细胞存在的肿瘤特异性或器官特异性标记以及肿瘤细胞本身的形态学特征等。选择两个阶段的不同方法并加以有效结合，最终寻找出敏感度和特异性较高的简便、精确的方法。

    2.1 细胞筛选/富集技术 富集方法通常是CTCs物理性质(密度和大小)或免疫磁性的分选，常用的细胞富集技术主要包括密度梯度离心法、过滤法、免疫磁性分选技术(Immunomagnetic Separation，IMS)。因ISM利用免疫磁珠结合活性蛋白质和被磁铁所吸引的特性，依靠被分离细胞上抗原与包被磁珠的抗体的特异性反应形成抗原—抗体、磁珠免疫复合物。借助外加磁场完成对CTCs的筛选/富集。这类技术最大的优势在于分选过程避免了细胞裂解，但需借助细胞表面特异性标记物作为筛选的靶标，所以靶标的表达状况会影响分析方法的敏感性和特异性，且缺乏标准步骤及反应试剂等[5]。

    2.2 肿瘤细胞鉴定技术 常用的鉴定检测技术包括逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学技术(Immunocytochemistry，ICC)、荧光原位杂交技术(Fluorescence In Situ Hybridization ......