刘廷江 谷守义 王刚

    缺氧是恶性肿瘤的一种常见现象，可导致一系列基因的表达发生变化。低氧诱导因子-1α(Hypoixa inducible factor-1α，HIF-1α)在其中发挥着重要调控作用[1，2]。有研究表明，HIF-1α在膀胱癌、食管癌、胃癌等多种恶性肿瘤中表达增高[3-5]，但迄今有关HIF-1α在膀胱癌细胞中的作用机制还没有完全阐明。有研究发现，HIF-1α可以通过影响Survivin、Bcl-2等凋亡抑制基因而增强肿瘤细胞的抗凋亡作用[6，7]，但有关膀胱癌中HIF-1α与肿瘤细胞凋亡机制的研究尚不多见。因此，本研究检测了HIF-1α、Survivin、Bcl-2在不同膀胱移行细胞癌组织及正常膀胱组织中的表达，对HIF-1α在膀胱癌中的作用和临床意义进行了初步探讨。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 临床标本取自2009年12月至2012年4月在我科治疗并有病理证实的68例膀胱移行细胞癌患者，其中男51例，女17例;年龄39～78岁，平均年龄(61±11)岁。患者临床病历资料中，肿瘤病理分级：G1 24例、G2 28例、G3 16例;肿瘤分期：Ta～1 28例、T2～4 40例;初发膀胱癌42例，复发26例。另取20例正常膀胱组织(均取自良性前列腺增生行开腹前列腺切除患者)作为对照。

    1.2 方法 免疫组织化学染色(SP法)检测HIF-1α、Survivin、Bcl-2蛋白表达。兔抗人HIF-1α、Survivin、Bcl-2多克隆抗体、免疫组化试剂盒均购自美国Santa Cruz公司，按试剂盒说明采用SP法分别对肿瘤组织和正常膀胱组织对HIF-1α、Survivin、Bcl-2蛋白进行免疫组化染色，用PBS代替一抗做阴性对照、已知阳性切片作阳性对照。由两位病理医师双盲阅片进行结果判定。每张切片均随机取400倍光镜视野5个，在每视野中计数100个细胞。HIF-1α、Survivin、Bcl-2均以细胞浆呈黄色认为阳性染色。按肿瘤细胞阳性率和细胞着色强度分别记分。按阳性率记分标准：无阳性细胞为0分，阳性细胞≤10%为1分，11% ～50%为2分，51% ～80%为3分，>80%为4分。按着色强度记分标准：无着色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。两种记分相乘结果为0～1为阴性(-)，2～3为弱阳性(+)，4～7阳性(++)，≥8强阳性(+++) ......