曹宝森 李 霞 康 剑云 常 茂叶 张 凡 刘 宝生 王新生

    成熟淋巴细胞归巢到特定区域是穿越高内皮微静脉并进入外周器官的定向迁移，是一个高度调节的过程，关键步骤包括贴壁、滚动，粘附、捕获及迁移。而肿瘤淋巴结转移中的作用机制尚不清楚，但与淋巴归巢有相似之处。CD62L表达上调在T细胞贴壁滚动过程中发挥重要作用。黏膜地址素细胞粘附分子(MadCAM-1)是外周淋巴结血管地址素，与相应受体的结合诱导淋巴细胞的游走和归巢过程，然而关于CD62L、Mad-CAM-1在非小细胞肺癌表达研究尚少。笔者通过免疫组化染色分析CD62L、MadCAM-1在非小细胞肺癌、转移淋巴结和正常肺组织、无转移淋巴结中的表达，探讨CD62L、MadCAM-1表达与肺癌发展以及淋巴结转移之间的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 2007年1月至2011年12月河北北方学院附属第二医院、河北北方学院附属第一医院住院的手术切除后经病理诊断为非小细胞肺癌患者60例，其中腺癌20例，鳞癌24例，腺鳞癌10例，大细胞未分化癌6例;肺癌转移淋巴结30例，无肺癌转移淋巴结30例，正常肺组织30例。所有患者术前未经化疗和放疗，无其他恶性肿瘤史。所有标本均经病理确诊。

    1.2 免疫组化染色 一鼠抗人单克隆抗体购自武汉博士德试剂公司，组织石蜡块包埋，4 μm连续切片。主要免疫组化步骤:二甲苯脱蜡、梯度酒精至水，3%双氧水灭活内源性过氧化酶，PBS缓冲液振洗，微波炉进行抗原热修复，正常山羊血清封闭、一抗冰箱过夜，二抗 、三抗各1 h，DAB显色10～15 min，复染核脱水透明，中性树胶封片。结果判断:着色细胞<10%为阴性，>10%为阳性。CD62L阳性物质定位在肿瘤细胞质和细胞膜，MadCAM-1阳性部位定位在高内皮微静脉内皮细胞浆和细胞膜。采用HIPAS100图象分析软件对所有切片进行图象分析，首先低倍镜寻找每张切片着色的典型区域，每张切片随机选取10个着色典型区域且不重复的视场，放大400倍镜下测量每个视场中阳性灰度单位，取其均数即为该切片的着色强度(即灰度单位)。

    1.3 统计学分析 应用SPSS 10.0统计软件，不同组间表达率的比较采用Fisher精确概率法，各指标在同一组间的表达水平以及与浸润程度之间作直线回归相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 CD62L的表达率情况 CD62L在肿瘤组织中表达在肿瘤细胞、脉管内癌栓、间质浸润的淋巴细胞;在转移淋巴结主要表达在转移灶肿瘤细胞、脉管内癌栓以及淋巴细胞;在正常肺组织以及无转移淋巴结主要表达在成熟淋巴细胞;CD62L在癌组织中表达高于正常肺组织(P<0.05);转移淋巴结中的表达高于无转移淋巴结表达(P<0.05);CD62L在转移淋巴结中表达与癌组织中的表达相比无差异(P>0.05);CD62L在正常肺组织表达与无转移淋巴结表达无差异(P>0.05);CD62L在癌组织中阳性表达率65%(39/60)明显高于正常肺组织10%(3/30)(P<0.05);转移淋巴结中的阳性表达率70%(21/30)明显高于无转移淋巴结阳性表达率17%(5/30)(P<0.05);CD62L在转移淋巴结中表达率与癌组织中的表达率相比无差异(P>0.05);CD62L在正常肺组织表达率与无转移淋巴结表达率无差异(P >0.05) ......