布地奈德对哮喘小鼠IL-23与 Th17细胞表达的作用研究
气道,1材料与方法,2结果,3讨论
闫晓燕 高晓增 逯春洁 许景伟 张俊玲 赵凤珍支气管哮喘是一种变态反应性疾病,发病机制复杂,Th1/Th2失衡理论仅能部分解释哮喘的发病机制,而最近对Th17细胞的研究则完善并补充了哮喘的具体发病机制[1]。布地奈德作为一种表面激素,是治疗哮喘的主要药物[2,3]。本研究通过建立小鼠哮喘模型,观察布地奈德对小鼠Th17细胞以及白介素-17(IL-17)和白介素-23(IL-23)表达的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 8周龄SPF级雌性Balb/c小鼠30只,平均体重(20.5±1.2)g,河北医科大学实验动物中心提供。随机分为正常组、哮喘组和布地奈德组,每组10只。
1.2 试剂与设备 卵白蛋白 (OVA,美国Sigma);液态铝(上海化学试剂公司);IL-17和IL-23 ELISA检测试剂盒(Bender Medsystem公司);布地奈德雾化吸入混悬液(阿斯利康公司);FACS流式细胞仪、大鼠抗小鼠荧光抗体标记FITC-IL-17、PECD4及红细胞裂解液(购自美国美国BD公司)。
1.3 试验方法
1.3.1 哮喘模型的建立:参照唐配弦的《造血细胞培养技术》进行哮喘模型的制备,于实验的第1、7天腹腔注射致敏原0.2 ml(由0.01%的 OVA 与液态铝各0.1 ml组成)致敏,第14天起给予2.5%OVA溶液雾化吸入,连续激发7 d,并同时给予0.9%氯化钠溶液0.2 ml腹腔注射,每天1次,连续7 d。对照小鼠用等量的0.9%氯化钠溶液代替OVA。布地奈德组于每次激发前30 min给予布地奈德雾化吸入20 min(布地奈德0.2 mg) ......
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