王素格 李德征 蒋树林 秦明月

    近年来人们生活水平日益提高，而日常膳食中以脂肪为代表的高热量食物成分所占比例明显增加，使非酒精性脂肪肝炎(non alcoholic steatohepatitis，NASH)的发病率日益增长[1]，从而成为人们普遍关注的问题。有大量研究发现，胰岛素抵抗(IR)是NASH发病的首要环节[2-4]，而过氧化物酶体增殖物激活 受 体 α(peroxisomeproliferator-activated receptoralpha，PPARα)是调节胰岛素敏感性的一个重要因子，并且它的激动剂可能减少肝脏的脂质沉积，从而使脂肪性肝炎得到改善，因此我们通过高脂饮食诱导脂肪肝胰岛素抵抗模型的成立，然后观察IR及PPARα的mRNA在NASH中的表达情况，为NASH的治疗提供新的药物作用靶点。

    1 材料与方法

    1.1 建立动物模型 雄性SD大鼠60只，体重120～160 g，鼠龄4～6周，分笼饲养在温度22～28℃动物室中，明暗各12 h，自由进食及饮水，适应性饲养1周后，随机分为4组，正常组20只、高脂组20只，实验组10只、实验对照组10只。正常组喂饲普通饲料;高脂组、实验组、实验对照组喂饲高脂饲料[5，6]，其配方:普通饲料加1%胆固醇和10%蛋黄粉、10%猪油，-20℃冰箱保存，喂前平衡室温。12周末时正常组与高脂组各取10只一并进行钳夹及肝组织石蜡切片HE染色，确定胰岛素抵抗脂肪肝动物模型造模成功;实验组在高脂饮食同时给予非诺贝特80 mg·kg-1·d-1灌胃;实验对照组将高脂饮食改为正常饮食;实验组每天定时给药，其余各组均给予等体积的0.9%氯化钠溶液灌胃，持续4周后所有大鼠分别测定胰岛素敏感性，然后处死大鼠留取所需标本。

    1.2 主要试剂 胆固醇购自南京新百药业有限公司，猪油由河北医科大学实验动物中心提供，非诺贝特(力平之)200 mg为法国利博福尼公司产品，丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)采用德国Bbyer公司的全自动血清生化分析仪检测，由河北医科大学第二医院生化室协助。RNA提取试剂盒及GAPDH均为北京赛百盛基因技术有限公司产品。

    1.3 观察指标及测定方法

    1.3.1 一般情况:每天观察动物的毛色、活动及粪便与进食水情况，每周测定大鼠体重。

    1.3.2 空腹血清TC、TG、ALT、AST及血糖测定:用全自动生物化学分析仪测定，全部应用酶法完成。

    1.3.3 病理学检查:中性甲醛固定肝标本 ......