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编号:283063
扶正化瘀方对大鼠肝再生过程中cyclinD1影响的实验研究
http://www.100md.com 2013年3月30日 河北医药 2013年第11期
细胞核,1材料与方法,2结果,3讨论
     张玉果 赵素贤 李建梅 任伟光 李亚 南月敏

    前期动物实验表明扶正化瘀方可提高大鼠肝大部切除后24 h的肝再生速度。本实验拟进一步验证扶正化瘀方对大鼠肝再生的影响,采用大鼠肝大部切除(partial hepatectomy,PH)肝再生模型,以促肝细胞生长素(hepatocyte growth promoting factors,pHGF)为阳性对照药物,研究扶正化瘀方对大鼠肝大部切除后72 h cyclinD1和肝再生的影响,探讨扶正化瘀方促进肝再生的可能作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物与试剂 清洁级雄性Wistar大鼠24只,体重240~280 g,购自河北医科大学实验动物学部(合格证号:1201030)。扶正化瘀方药液为由上海黄海制药有限责任公司生产的扶正化瘀胶囊用蒸馏水配制成75 g/L。促肝细胞生长素(pHGF)购自长春富春制药有限公司,批号 H20058141。兔抗人cyclinD1单克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。GAPDH、cyclinD1引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。FastQuant cDNA第一链合成试剂盒和RealMasterMix购自天根生化科技(北京)有限公司。

    GAPDH上游引物:5'-ACCACAGTCCATGCCATCAC-3',GAPDH下游引物:5'-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3';cyclinD1上游引物:5'-GCACAACGCACTTTCTTTCC-3',cyclinD1下游引物:5'-TCCAGAAGGGCTTCAATCTG-3'。

    1.2 动物分组 将雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(对照组)、模型(PH)组、PH+扶正化瘀组和PH+pHGF组,每组6只。于实验前3 d至实验结束,扶正化瘀组给予扶正化瘀药液灌胃1 ml/100 g,pHGF组给予腹腔注射pHGF 1 ml/100 g,对照组、模型组均给予腹腔注射0.9%氯化钠溶液1 ml/100 g ......

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