杨志诚 赵云刚 刘明雨

    结直肠癌是人类常见的恶性肿瘤，居全世界恶性肿瘤死因的第二位，近年来发病率呈明显上升趋势[1]。侵袭转移是结直肠癌的重要死亡原因，也是影响临床治疗和预后的主要因素。研究表明，多种生物因子与肿瘤的侵袭转移相关。本实验应用免疫组化SP法检测凋亡抑制因子Survivin和核因子-κB(NF-κB)在65例结直肠癌标本中的表达，探讨Survivin和 NF-κB与结直肠癌病理参数的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集我院2009年9月至2012年3月手术切除的原发性结直肠癌患者标本65例，其中，男38例，女27例;所有标本均有明确病理分型，患者术前均未接受放疗、化疗;有结直肠癌家族史者不纳入本试验。结肠癌35例，直肠癌30例;低分化癌28例，中、高分化癌37例;有淋巴结转移30例，无淋巴结转移35例;DukesA期13例，B期21例，C期28例，D期3例。并取40例患者癌旁正常组织，距肿瘤边缘10 cm以上各1块。中性甲醛固定，常规乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋并制备4 μm厚连续病理切片，切片分别进行HE染色和免疫组织化学染色。

    1.2 免疫组织化学染色 兔抗人Survivin、NF-κB多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，SP试剂盒、DAB试剂盒购自中杉金桥公司。切片脱蜡至水，采用免疫组织化学链霉素-生物素过氧化酶(SP)染色法，切片置于抗原修复液(0.01 mol/L柠檬酸盐)中高压锅热修复30 min ......