翟雨佳 闫闪闪

    人表皮生长因子2(C-erbB-2/HER-2/neu)是公认的乳腺癌标记物，也是指导临床使用赫赛汀的惟一指标，Ki-67是一种在增殖细胞中表达的核抗原，是肿瘤增殖活性最重要的检测指标[1，2]。本文用免疫组化(immunohistochemistry，IHC) 法检测95例患者C-erbB-2和Ki-67蛋白的表达情况，探讨乳腺癌中两种蛋白表达的相关性及临床意义。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集我院2007年11月至2011年临床病理资料完整的乳腺癌病例95例，患者均为女性;年龄20～88岁，平均年龄53.1岁，中位年龄54岁。术前未行任何辅助治疗(化疗、内分泌治疗、放疗)，其中浸润性小叶癌4例，黏液癌7例，浸润性导管癌84例。

    1.2 试剂 鼠抗人C-erbB-2单克隆抗体(即用型)、鼠抗人Ki-67单克隆抗体(即用型)及免疫组化试剂盒均购自北京中杉金桥公司。

    1.3 免疫组化

    1.3.1 操作步骤:采用EnVision法检测C-erbB-2，10%中性甲醛溶液固定，常规石蜡包埋切片(厚度4 μm)，贴于涂有多聚赖氨酸的玻片上，常规脱蜡至水，0.3%过氧化氢甲醇溶液灭活内源性过氧化物酶，高温高压修复抗原，其余步骤按试剂盒说明操作，用已知阳性切片作阳性对照，磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作阴性对照。

    1.3.2 结果判读:C-erbB-2蛋白的表达定位在细胞膜，无着色为(-)，任何比例的浸润癌细胞呈现微弱、不完整的细胞膜着色为(+)，>10%的浸润癌细胞呈现弱至中等强度、完整但不均匀的细胞膜棕黄着色或≤30%的浸润癌细胞呈现强且完整的细胞膜棕褐着色为(++)，>30%的浸润癌细胞呈现强的完整的细胞膜棕褐着色为(+++)[1];Ki-67阳性为胞核着色，≤5%者为(-);阳性细胞数6% ～25%者为(+);26% ～50%者为(++);>50%者为(+++)。

    1.4 随访调查 对95例乳腺癌患者进行术后随访调查，记录其手术日期、当前身体状况或死亡日期。

    1.5 统计学分析 应用SPSS 17.0统计软件，C-erbB-2和Ki-67与临床病理相关因素相关性的比较采用χ2检验 ......