沈彦 周颖 赵敏 魏艳芹

    结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，结肠癌的形成和转移的发生是一个复杂的生物学过程，是多种基因和因子共同调控作用的结果。E-cadherin是介导上皮性肿瘤细胞间黏附和信号转导的重要分子，它的异常表达可导致癌细胞去分化和侵袭性增强。CD44与肿瘤的侵袭和转移密切相关而被认为是肿瘤转移相关基因，其中以含有外显子V6的CD44变异体与肿瘤侵袭、转移的关系最为密切。缺氧微环境与实体肿瘤的预后不良有关，这与缺氧微环境增加癌细胞侵袭和转移潜能有关，参与这一过程的氧调节的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)起着重要的作用。本文探讨E-cadherin、CD44V6、HIF-1α在结肠癌发生、转移中的作用。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2008至2010年秦皇岛市第一医院手术切除的结肠癌癌组织和癌旁正常结肠组织的存档蜡块90例，男50例，女40例;年龄36～78岁，平均52岁;术前均未行放化疗，高分化腺癌20例，中分化腺癌37例，低分化腺癌33例;无淋巴结转移42例，有淋巴结转移48例;Dukes分期，A期20例，B期22例，C期30例，D期18例。所有标本均经4%中性甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋、切片。

    1.2 试剂与方法 E-cadherin、CD44V6和HIF-1α抗体均为鼠抗人单克隆抗体，购自福州迈新生物技术开发公司，采用免疫组织化学SP法对结肠癌组织中E-cadherin、CD44V6和HIF-1α进行检测，按试剂盒说明书操作，用已知阳性的切片做阳性对照，PBS代替一抗为阴性对照。

    1.3 结果判定 E-cadherin在细胞膜或细胞质表达，呈均匀的棕黄色线状，根据染色强度及着色细胞百分率进行评定和分析:基本不着色为0分，着色淡为1分，着色适中为2分，着色深为3分;着色细胞占计数细胞的百分率≤5%记0分，6% ～25%记1分，26% ～50%记2分，≥51%记3分。将每张切片的染色程度和染色细胞百分率得分相乘，其乘积为最后得分。0～1分为阴性(-)，2～3分为弱阳性(+)，4～6分为中等阳性(++) ......