张学艳 张幽燕 常红云

    脑血管病是一种常见病和多发病，其发病率、致残率、病死率均较高。脑缺血急性期及时恢复脑血流灌注，改善缺血区血供，一直是治疗缺血性脑卒中的重点。尤瑞克林主要成分为人尿激肽原酶，能分解产生血管缓激肽和血管舒张素，实验研究表明:应用尤瑞克林能够减少脑梗死面积[1]，减轻神经功能受损，其机制可能与促进血管新生和神经细胞增殖、迁移、分化、减少细胞凋亡等有关[2]。药效学研究显示，尤瑞克林可选择性扩张缺血部位细小动脉，改善梗死灶内供血[3]，并促进损伤部位新生血管生成[4]，从而对急性脑梗死起到治疗作用。脑缺血的发病机制复杂，其中细胞凋亡仍然是脑缺血损伤机制研究的重要内容。凋亡是指机体在生理条件下受到刺激后，经过多种信号转导引起细胞程序性死亡的过程。关于尤瑞克林从细胞凋亡角度对脑保护作用机制国内笔者很少见报道。本研究从细胞凋亡角度探讨尤瑞克林的保护作用，为临床应用尤瑞克林提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组 选用成年健康SD大鼠60只，雌雄各30只，体重250～300 g。实验动物级别:普通级。随机分为假手术组、单纯缺血组、尤瑞克林组(低剂量组、中剂量组、高剂量组)，每组12只。参照文献[5]给药:尤瑞克林组用灭菌0.9%氯化钠溶液分别稀释为3.75 ×10-3、8.75 ×10-3、17.25 ×10-3PNA单位/kg，给药量1 ml/kg，分别于缺血后30 min及23.5 h 2次经舌下静脉给药。余2组予同等剂量0.9%氯化钠溶液。

    1.2 试剂与仪器 注射用尤瑞克林(广东天普生化医药股份有限公司提供)。bcl-2、bax蛋白测定试剂盒:武汉博士德生物工程公司。连续变倍体视显微镜160×:桂林仪器厂;CIAS-1000型图像分析仪:北京大恒图象视觉有限公司;LKBⅢ型超薄切片机:瑞典;电子天秤:上海天平仪器厂;石英自动双重纯水蒸馏器:江苏丹阳门石英玻璃厂;烘片、烤片机:孝感市电子仪器厂。

    1.3 局灶性脑缺血模型制备 参照Longa等采用线栓法[6]制备MCAO，大鼠手术前12 h禁食不禁水，健康SD大鼠称重后，按10%水合氯醛0.3 ml/100 g腹腔注射麻醉 ......