张小锋

    响应面分析法(RSM)是一种基于响应变量与输入变量关联性研究的函数关系，也是一种工艺优化的有效方法[1]，目前被广泛应用于食品、生物、化工、农业等多个领域，并获得了较好效果[2]。原动蛋白2 具有生物节律传递性、神经元迁移影响性、促进胃肠道平滑肌收缩等作用。原动蛋白2 在基因转录过程中经可变剪接的mRNA 翻译后加工处理可形成一种衍生蛋白质因子，称为“原动蛋白2β(PK2β)”。目前生物学对于PK2β 的研究内容不多，本研究主要采用RSM 方法对重组PK2β 的诱导条件及影响因素进行研究和探讨，为基因生物学蛋白质制备等提供有效依据。报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与材料Luria-Bertani(LB)培养基配置:10 g/L 胰蛋白胨(Tryptone)，10 g/L 氯化钠(NaCl)，5 g/L 酵母提取物(Yeast extract)，并利用NaOH 将培养基溶液的pH 值调整至7.4[3]。溴酚蓝由北京精益精化工有限有责任公司提供。考马斯亮蓝由上海沪宇生物有限公司提供。卡那霉素由四川方向药业有限责任公司提供。IPTG 由武汉鸿雨新科技有限公司提供。丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺均选用超级纯纯度，由上海生工生物工程有限公司提供。冰醋酸、过硫酸铵、乙醇等均选用分析纯纯度，由南京化学试剂有限公司提供。PK2β 表达重组菌株E.coli BL21(DE3)由上海浩然生物技术有限公司提供。

    1.2 方法

    1.2.1 诱导方法:LB 培养基30 ml 加入卡那霉素，重组菌株E.coli BL21(DE3)取3 μl 冻存液接种于培养基上，转入220 r/min转速和37℃恒温条件下的电动机中过夜 ......