王红杰 张建新 解丽君 刘芳 苏红 苏小华

    心肌缺血再灌注损伤是多因素导致的病理过程，存在多种信号转导途径且有交互作用(cross-talk)，其中，炎性反应贯穿于心肌缺血再灌注损伤的全过程[1]。研究表明，高血糖和氧化应激的主要靶点是核转录因子NF-κB，并通过其调控与炎症、细胞增殖、细胞分化等密切相关的多种基因的表达[2]。NF-κB也存在于心肌细胞中，它的活化及其调控的一系列信号分子的表达在心肌缺血再灌注损伤中发挥了关键性的作用[3，4]。静脉麻醉药异丙酚通过抑制再灌注诱发的炎性反应可减轻心肌缺血再灌注损伤[5]，但其对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时炎性反应的影响尚不明确。本研究拟通过观察异丙酚对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞内NF-κB活性及其下游的炎性因子的影响，探讨异丙酚对糖尿病心肌保护作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 糖尿病模型的制备 健康雄性SD大鼠100只，体重230～280 g，随机分为糖尿病组76只和非糖尿病组24只。禁食12 h，糖尿病组腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)55 mg/kg，72 h后剪尾尖采血测定血糖，以后每周测血糖，连续3周血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病大鼠(76只大鼠造模成功60只);非糖尿病大鼠腹腔注射等量缓冲液。

    1.2 心肌缺血再灌注损伤模型制备 10%水合氯醛350 mg/kg腹腔注射麻醉，气管插管，机械通气，经右侧颈总动脉插管，由 Powerlab/30八通道生理记录仪同时记录心率(HR)、平均动脉压(MAP)。左侧颈内静脉插管，静脉输注异丙酚。结扎左冠状动脉前降支30 min，再灌注120 min，制成心肌缺血再灌注损伤模型。

    1.3 动物分组与给药 24只非糖尿病大鼠随机分为假手术组(Ⅰ组)和缺血再灌注组(Ⅱ组)，60只糖尿病大鼠随机分为假手术组(Ⅲ组)、缺血再灌注组(Ⅳ组)、异丙酚低(Ⅴ组)、中(Ⅵ组)、高(Ⅶ组)剂量组，每组12只，Ⅴ组、Ⅵ组、Ⅶ组分别从缺血前 10 min 开始持续静脉滴注异丙酚 3、6、12 mg·kg-1·h-1，Ⅰ～Ⅳ组静脉输注等量的0.9%氯化钠溶液。

    1.4 主要试剂与仪器 异丙酚(批号0701221，四川蜀乐药业股份有限公司)，链脲佐菌素(STZ，Sigma公司，美国)，鼠NF-κB p65单克隆抗体(美国 Santa Cruz公司)，鼠血清及组织TNF-α、IL-6 ELISA检测试剂盒(美国R＆D公司)，SP免疫组化检测试剂盒和DAB显色试剂盒(北京中杉金桥公司);One-Tonch血糖仪及One-Tonch血糖试纸(LifeScan公司 ......