巨名飞 崔春燕 李金萍 张爱文 侯瑞田

    动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性疾病，炎症反应伴随其发展始终[1]。炎性因子和炎性细胞间相互作用是AS发病机制的核心。抗炎治疗作为一种有效的治疗手段，越来越受到人们的重视。白细胞诱素-1(Lkn-1)是新发现的炎性因子，具有强烈趋化白细胞向炎症损伤部位快速聚集，促使前炎性介质释放和血栓形成的作用。国外有报道Lkn-1与AS的发生发展有着密切关系[2]。阿托伐他汀为，除具有调酯作用外，还具有抗炎、改善血管内皮功能、抗氧化、调节细胞增殖等作用，近年他汀抗炎作用越来越受心血管领域重视，在降低心血管事件发生率上起着重要作用[3，4]。本实验以ox-LDL诱导的U937细胞形成的泡沫细胞为AS实验模型，观察阿托伐他汀对ox-LDL诱导U937细胞形成泡沫细胞过程中炎性因子Lkn-1表达的影响，进而研究其动脉粥样硬化过程中的抗炎作用。

    1 材料与方法

    1.1 药品和试剂 阿托伐他汀提取物辉瑞公司馈赠。佛波酯购自Sigma公司。鼠抗人Lkn-1抗体购自R＆D公司。RPMI-1640培养基和Trizol购自Gibco公司。M-MLV逆转录酶、Taq DNA聚合酶、10 mmol/L dNTP、Oligo(dT)购自 Promega公司。引物由上海生工合成。其他试剂均为进口或国产分析纯。

    1.2 氧化型低密度脂蛋白制备 低密度脂蛋白(LDL)的纯化、氧化修饰及鉴定采集健康成人空腹12 h后新鲜混合静脉血，加入100 mmol/L EDTA抗凝。采用超速离心法分离离心速度42 000 r/min获得LDL提取液，经琼脂糖电泳显示为单一蛋白带。将LDL置于含10μmol/L CuSO4的PBS溶液(pH值7.4)中，37℃温育24 h。氧化后的LDL置含200μmol EDTA的PBS中透析24 h，PBS再透析24 h，过滤除菌后4℃保存。LDL中的脂过氧化物在氧化过程中增加，颜色也由逐渐变浅。琼脂糖电泳显示，OxLDL的电泳迁移速率快于未氧化的LDL。

    1.3 U937细胞培养及诱导分化 人U937单核细胞株由吉林大学基础免疫教研室馈赠 ......