李萍 向彬 曾常茜

    透骨草(Phryma leptostachya L.var.asiatica Hara)为透骨草科植物的干燥全草入药，产于凌源、绥中、金洲、大连等地，其化学成分为透骨草素、倍半木酚素、呋喃类等，主治黄水苍、湿疹、跌打损伤、骨折等，具有清热解表、活血消肿作用[1-3]。本文在其传统功效的基础上，观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响，并通过检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞β-catenin和cyclin D1蛋白表达的影响，进一步探讨透骨草提取物对SMMC-7721细胞作用的分子机制，旨在为透骨草抗肝癌作用的研究提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 药品、试剂及仪器 人肝癌SMMC-7721细胞，由吉林省肿瘤研究所提供;鼠抗人β-catenin、鼠抗人cyclin D1抗体购自均购自北京中杉金桥公司，通用型SP试剂盒、DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术公司。RPMI 1640、小牛血清和胰蛋白酶为美国Gibco公司产品;MTT和DMSO为Sigma公司产品;药物采自辽宁金州大黑山，经王心毓老先生鉴定为透骨草科植物(Phryma leptostachya L.var.asiatica Hara);酶联免疫检测仪(Sunrise F039300)，奥地利 Tecan公司;BB16UV型 CO2培养箱，德国Heraeus公司。

    1.2 方法

    1.2.1 透骨草提取物制备方法:取干燥透骨草50 g，加8倍量75%乙醇，提取2 h，过滤，滤液水浴浓缩成干膏。

    1.2.2 细胞培养:使用RPMI 1640培养基 ......