薛军 武雪亮 贾光辉 王立坤 赵秀芳

    结直肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，近年来随着人们生活水平的提高，饮食结构的改变，其发病率呈逐年上升趋势[1]，其5年生存率徘徊在50% ～60%[2]。结直肠肿瘤的复发和远处转移是结直肠癌患者预后不良的主要原因。抑癌基因RUNX3是新近发现的一个肿瘤抑制基因，能调控细胞的生长发育和细胞的凋亡，对细胞的信号转导和其他生物学效应有着重要而复杂的转录调节作用[3]。它的异常表达和人类的多种恶性肿瘤的发生、发展有密切关系[4]。因此推测RUNX3蛋白在结直肠癌的形成和发展中具有重要作用。本研究应用免疫组织化学法检测了RUNX3蛋白在结直肠癌的常见类型腺癌组织和结直肠正常组织中的表达情况，结合临床病理资料，探讨其与结直肠腺癌发生、浸润和转移的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 随机选取60例蜡块标本，均来自河北医科大学第四医院外二科、河北北方学院附属第一医院普外科2008年1至12月的手术切除标本。癌标本取白肿瘤中心处，正常组织标本取自距肿瘤边缘>10 cm处。所有病例均经病理证实，无其他部位原发肿瘤，均为首次诊治患者，术前无放疗、化疗和免疫治疗史。标本取材后，部分置于液氮中速冻，然后转到-80℃冰箱中保存;部分标本用10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，用于免疫组织化学染色。

    1.2 试剂与方法 采用免疫组化(SP-9000通用型二步法检测)。1抗RUNX3兔抗人单克隆抗体购于北京中衫金桥生物技术有限公司，二氨基联苯胺(DAB)显色剂购于TIANGEN公司。实验步骤严格按试剂盒说明书操作，采用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照，采用已知的阳性片作为阳性对照。

    1.2.1 收集结直肠腺瘤组织及结直肠癌组织组织标本蜡块并切片:切片厚度4μm ......