段国辰 杜锦波 牛占丛

    化疗在非小细胞肺癌治疗中占有重要地位。常用的化疗方案来源于多地区，大样本的临床统计资料。但部分具有相同病理类型患者对同一化疗方案却显示不一样的疗效。如何选择化疗药物，实现肺癌患者的个体化治疗，提高疗效，已经成为国内外学者的研究热点。有文献报道:多种器官恶性肿瘤的原代细胞培养及其药敏实验可以作为个体化化疗的理论指导[1，2]。研究证实，不同个体之间对药物的敏感性与其遗传因素有着很大的关系。外周静脉血淋巴细胞与实体瘤细胞同样具有耐药基因的表达[3]。有文献报道MTT法检测自身外周血淋巴细胞和患者癌细胞对同一化疗药物的敏感性存在良好的正相关性[4]。然而其相关性在肺癌方面的研究甚少。本实验采用MTT法测定60例自身外周血淋巴细胞及其肺癌细胞对常用的4种化疗药物的敏感性，探讨两者的相关性旨在用外周血淋巴细胞替代肺癌细胞进行化疗药敏检测。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2011年03月至2011年09月我院收治的60例肺癌手术标本，且术前均未接受放疗及化疗治疗。其中鳞癌34例，腺癌26例。根据UICC(1997)的分期标准:Ⅰb期10例，Ⅱ期30例，Ⅲa期20例。切除的肿瘤组织，均有病理学诊断。

    1.2 方法 在手术室无菌条件下，取约黄豆大小的肿瘤组织，经大量0.9%氯化钠溶液充分冲洗后置于含有双抗的RPMI-1640培养液的标本瓶中，立即送检。所有患者于术中切除肺癌组织后抽取外周静脉血2 ml置于EDTA管中。

    1.2.1 肺癌细胞单细胞悬液制作方法:①取小块约黄豆大小的新鲜肿瘤组织用500 ml 0.9%氯化钠溶液充分洗净去除表面的血细胞后立即浸入含有双抗的RPMI-1640培养液的无菌小瓶中，立即送往实验室。②将取下的肿瘤组织放入培养皿中，用RPMI-1640液冲洗后再用眼科剪去除组织表面的脏层胸膜，及非肿瘤组织。再将肿瘤组织用眼科剪剪成肉末状。③加入0.5 ml胰酶消化液放入37℃恒温箱中培养15 min。④取出消化好的肿瘤组织，加入10 ml含有10%胎牛血清的RPMI-1640液终止消化。⑤将此肿瘤细胞液经200目的钢网过滤，再反复吹打，即可得到单细胞肿瘤液 ......