董玉霞 闫宝环 彭景丽 鲍云波 沈颜红

    结核病是一个全球性的重要的公共卫生问题，根据WHO统计，每年全球约300万人死于结核病。尤其是在最近十年，结核病在全球疫情又呈上升趋势，对一些国家已构成严重的健康威胁。因此，找到一种快速、特异的诊断方法，以控制结核病的传播具有重要的意义。近年来随着对结核病的研究的不断深入和科学技术的不断进步，实验室诊断技包括细菌学、血清免疫学和分子生物学三个方面有了很大的进展，综述如下。

    1 细菌学检测方法

    结核分枝杆菌的检测是病原学诊断的可靠标准，并且可作为判断结核病治疗疗效、结核活动的主要指标。传统的涂片镜检法、改良罗氏培养法等检测方法虽然设备简单、费用低廉等优点，但往往有检出率低，周期长等局限性[1]。在近十多年以来，针对结核分枝杆菌的特性，建立了一系列快速检测系统。

    1.1 Bactec检测系统(包括460TBBactec、BACTEC MGIT 960TB、MB/BacTec)460TBBactec方法阳性率约为80%，比传统的改良罗氏培养法(L-J法)明显提高;检测时间约9～14 d，明显比 L-J法缩短[2]。但是因底物有放射性，易污染环境，且设备价格昂贵，不宜推广。

    BACTEC MGIT 960系统是集分枝杆菌快速生长培养、检测及药敏技术为一体的全自动分枝杆菌培养仪。Rishi等[3-5]的研究结果显示，该方法较固体培养法L-J法缩短了诊断时间并提高了诊断的敏感性。MB/BacTec系统是和BACTECMGIT 960系统相同，是应用液体培养的系统，此系统对标本中结核分枝杆菌复合群进行分离，和BACTEC-460系统相比，在肉眼下可看到结核杆菌生长，初分离率明显提高，并且无放射污染，但是缺点是不能作菌型鉴定[6，7]。

    1.2 噬菌体扩增法和噬菌体生物发光检测 菌体扩增法是近年来新出现的用于检测结核分枝杆菌中活菌的快速诊断方法，原理是:噬菌体在适宜条件下侵入标本中活的结核杆菌体内，在菌体内进行增殖，游离的噬菌体以噬菌体杀灭剂杀死，此时加入快生长分枝杆菌，此时侵入细菌体内的噬菌体大量繁殖，释放出来，使结核杆菌指示细胞被感染、破坏、裂解，在电泳琼脂版会出现噬菌斑。正常情况下，被加入噬菌体灭活剂后，因无噬菌体破坏指示细胞，使指示细胞在琼脂版上均匀生长。据噬菌斑出现情况，判断有无活菌生长，该方法灵敏度高，且不需要高致病菌的结核分枝杆菌和特殊设备，可用于快速检测活的结核杆菌。贺瑜[8]应用此方法检测结核分枝杆菌进行流行病学调查，赵庆华等[9]采用噬菌体法和涂片法比较观察269例住院肺结核患者疗效 ......