EZH2与PCNA、P16蛋白在胃癌组织中表达的关系和意义
免疫组化,病理,3讨论
高德全 赵彦婷 刘云云 冀增海·论著·
EZH2与PCNA、P16蛋白在胃癌组织中表达的关系和意义
高德全 赵彦婷 刘云云 冀增海
目的检测EZH2、增殖细胞核抗原(PCNA)、P16蛋白在胃癌及癌旁正常组织中的表达情况,分析EZH2与患者临床病理特征及预后的关系。方法收集62例胃癌手术患者的肿瘤及52例癌旁正常胃粘膜组织石蜡标本进行免疫组织化学染色,并收集患者的临床病理特征及随访资料,同时检测PCNA、P16蛋白的表达,分析这3种蛋白质之间的关系;分析EZH2与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。结果胃癌组织中EZH2、PCNA表达均较癌旁组织明显增强(P0.05)。EZH2表达与胃癌肿瘤浸润深度、分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P1 资料与方法
1.1 一般资料 收集我院2005年8月至2011年7月确诊为胃癌行手术切除肿瘤并术后病理证实的患者胃癌石蜡标本62例,其中52例有癌旁正常组织。所有患者临床病理资料完整,患者术前均未接受放、化治疗,均有术后随访资料。其中男48例,女14例;年龄37~72岁,平均年龄(59.2±11.3)岁。兔抗人EZH2、PCNA、P16多克隆抗体均购自美国Abcam公司,免疫组化试剂盒购自北京中杉生物技术公司。
1.2 免疫组化染色 组织均为4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋后4 μm连续切片,进行苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosinstaining,HE)和免疫组化SP染色。切片经脱蜡水化、3%过氧化氢孵育、蒸馏水冲洗等过程后PBS浸泡进行抗原修复。免疫组化试剂盒操作过程:封闭、分别加入各一抗、孵育、冲洗后依次加二抗和辣根酶标记链霉卵白素工作液。DAB显色,苏木素复染,脱水,透明,中性树脂封片。
1.3 免疫组化结果判断标准 SP染色结果由两位病理专业医师双盲阅片判断。每张切片随机取5个400倍视野,每视野计数100个细胞,根据细胞染色的阳性率计算评分。EZH2、PCNA蛋白以细胞核出现黄褐色或棕褐色为染色阳性,P16蛋白以细胞浆或细胞膜出现黄褐色或棕褐色为染色阳性。记分标准如下:细胞内阳性表达率2 结果
2.1 胃癌与癌旁正常组织中EZH2、PCNA、P16的免疫组化结果 免疫组化结果显示 ......
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