侯俊德 宋子贤 张玉相 贾慧群

    ·论著·

    血必净对脓毒症大鼠体内MMP-9水平的影响及对肺脏的保护作用

    侯俊德 宋子贤 张玉相 贾慧群

    目的通过对脓毒症大鼠血清中MMP-9浓度的影响并结合肺脏形态学及超微结构的变化，探讨血必净注射液对肺脏的保护作用及其作用机制。方法选用雄性S-D大鼠45只随机分为3组：空白组(Sham组)、盐水组(NS组)、血必净组(X组)，每组15只。检测血清MMP-9水平、肺湿/干重比(W/D)、HE染色法光镜观察肺脏形态学改变，透射电镜观察肺脏血管内皮细胞的超微结构。结果与Sham组比较，NS组、X组大鼠肺湿/干重比均明显增大(P1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组 健康雄性Sprague-Dawley大鼠45只，体重250～300 g，由河北医科大学实验动物中心提供。随机分为3组(每组15只)：空白组(Sham组)，盐水组(NS组)，血必净组(X组)。Sham组：盲肠不结扎也不穿孔，余操作相同，术毕尾静脉给予0.9%氯化钠溶液4 ml/kg。NS组：盲肠结扎穿孔(CLP)后，术毕尾静脉给予0.9%氯化钠溶液4 ml/kg。X组：CLP后给予血必净注射液(天津红日药业股份有限公司)4 ml/kg尾静脉注射(生药浓度为500 g/L)。

    1.2 模型建立 Sprague-Dawley大鼠实验前饲养1周以适应实验室条件，实验前12 h禁食不禁水，实验时称重。腹腔注射10%水合氯醛(350 mg/kg)麻醉后，相对无菌条件下行左侧颈动脉置管。采用经典的盲肠结扎穿孔法(CLP)制模，其中Sham组不行盲肠结扎与穿孔，余操作相同。在造模6 h采血、取肺组织。

    1.3 标本采集及观测指标

    1.3.1 血清留取：由右颈总动脉测压管处缓慢采血2 ml，离心后留取上清液，转入EP管，于-70℃冻存，待全部实验结束后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中MMP-9含量。

    1.3.2 肺组织留取：经右颈动脉采血处死后，开胸取右肺中叶，精确称湿重，再置于85℃烤箱中24 h，至重量不再变化，称干重，计算肺湿/干重比。

    1.3.3 HE标本留取：由右颈总动脉采血处死动物后，迅速剪取右肺下叶放入4%的多聚甲醛中，浸泡固定72 h后包埋蜡块做HE染色用。

    1.3.4 电镜标本留取：处死动物后，迅速剪取右肺下叶放入4%的戊二醛中固定，H-7500透射电子显微镜(日本日立)镜检。

    1.4 统计学分析 应用SPSS 11.5统计软件 ......