武继伟

    何首乌为蓼科多年生草本植物的块根。一直以来被认为具有益寿延年、延缓衰老之功效，系著名的滋补中药[1]。研究表明，何首乌中的主要水溶性成分为2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D 葡萄糖苷(2，3，5，4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside，THSG，二苯乙烯苷)[2]。2000年药典将测定THSG化合物的含量作为何首乌及其制剂的质控标准。典灵辉等[3]发现何首乌的乙酸乙酯提取物能促进大鼠颅骨成骨细胞的增殖，并根据粗提物含量测定结果推测发挥这种作用的物质基础可能是THSG。本研究旨在从细胞水平证实THSG对成骨细胞增殖、分化的影响并初步探明其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂及仪器 THSG由本实验室提取，经

    HPLC检测纯度>98%;DMEM培养基、优质胎牛血清(Hyclone公司);胰蛋白酶、青霉素G、硫酸庆大霉素(Ameresco公司);MTT试剂、BCA试剂盒(碧云天生物技术研究所);碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性检测试剂盒(南京生物建成公司出品);Elisa试剂(Invitrogen公司);其余试剂为国产分析纯试剂。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞分离、培养与传代:大鼠成骨细胞按照文献所述的方法进行分离、培养和传代[4] ......