徐闽 李静 张婷婷 姜柳 单铁强 李天贺

    宫颈癌是女性最常见的一种恶性肿瘤，其发病率居女性恶性肿瘤第二位，每年约有51万女性患有此病，我国每年宫颈癌新增人数高达13.5万左右，严重威胁女性的健康和生命安全[1]。人乳头瘤病毒(HPV)是一种诱发外生殖器良性病变和造成女性子宫颈癌的主要病原体，依据不同亚型和宫颈发生危险的高低可将其分为低危型和高危型。低危型HPV可引起生殖器尖锐湿疣等良性病变和宫颈上皮内低度病变(CINⅠ);而高危型HPV与宫颈癌及宫颈上皮内高度病变(CINⅡ/Ⅲ)和SCC的发生密切相关，在工作中发现HPV基因型常常出现在宫颈细胞学异常的人群中较多，持续高危型HPV感染是宫颈癌发生首要条件。从HPV癌前病变到宫颈癌的发生一般需要数年到十几年，90%以上CIN有HPV的感染，而正常宫颈组织中仅占4%[2]。由此看来，及早检测并发现HPV的感染是非常重要的，同时宫颈癌是存在着一个较长的、可逆转的癌前病变，预防宫颈癌可以通过早期筛查和早期干预来实现[3]，可见为了降低宫颈癌的发病率，及早发现发病的潜在因素是至关重要的，因此人乳头瘤病毒病毒分型联合TCT及组织活检对宫颈癌及癌前病变诊断具有重要的临床价值。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集我院妇科门诊2010年12月至2012年12月就诊的380例疑似HPV感染的女性，年龄20～70岁，平均年龄(36.4±2.3)岁，首先对380例疑似HPV患者进行分型检测和液基薄层细胞学检测(TCT)，并对TCT阳性患者进行宫颈组织细胞学检查。

    1.2 方法

    1.2.1 HPV检测:收集标本转动宫颈刷或棉拭子，将宫颈刷或棉拭子上的细胞洗脱于1 ml 0.9%氯化钠溶液中。HPV检测采用人乳头瘤病毒HPV反向点杂交(RDB)基因分型技术，将待用的探针分别点到硝酸纤维素膜或尼龙膜上，每一个探针编一个号，再将待测的DNA样本与之杂交，再经相应的显色反应就能显出杂交信号。本实验使用广州中山大学达安基因股份有限公司提供的DAAN7600定量PCR检测仪及配套试剂，严格按照说明书进行操作检测。结果分析:按要求设定相应的参数后扫描输出实验结果，然后采用达安图像分析软件进行数据分析。检测中国人群中广泛分布的19种HPV基因型别，其中16种中危型:HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304;3种低危型:HPV6、11、43。

    1.2.2 TCT检测:采用特制颈管刷在宫颈外口及宫颈管转5周收集脱落细胞 ......