乌司他丁对大鼠创伤性脑水肿后NF-κB及IL-1β表达的影响
脑损伤,2结果,3讨论
都义日 杜雪江 于建设·论著·
乌司他丁对大鼠创伤性脑水肿后NF-κB及IL-1β表达的影响
都义日 杜雪江 于建设
目的通过观察大鼠创伤性脑水肿后脑组织中核转录子-κB(NF-κB)及白介素-1β(IL-1β)的变化,探讨乌司他丁(UTI)在大鼠创伤性脑水肿过程中对脑组织的保护作用及其机制。方法将30只健康成年SD大鼠随机分为正常对照组、创伤性脑水肿组及UTI干预组,每组10只。并于伤后8、24、72采用免疫组化法及血清ELISA法检测脑组织NF-κB和IL-1β的水平。结果创伤性脑水肿组和UTI组脑水肿部位NF-κB的活性和IL-1β的水平均较对照组明显升高(P1 材料与方法
1.1 实验动物及分组 选择SD大鼠30只,雌雄不拘,体重300~350 g。按照随机数字表分为正常对照组、创伤性脑水肿组及UTI干预组,每组10只。UTI治疗组预先静脉给予5×104U/kg ;其余两组给予等量0.9%氯化钠溶液。
1.2 模型制作 在室温条件下,用戊巴比妥(40 mg/kg)麻醉后,固定于脑立体定向仪上,头顶剪毛,常规消毒。采用Marmarou等[2]创立的自由落体撞击法制作。于大鼠麻醉后,切开头皮,暴露顶骨,以牙科树脂将直径10 mm、厚3 mm的金属头盔牢固粘于顶骨前、后囟之间。以450 g砝码自1.5 m高度自由落下,建立创伤性脑水肿模型。
1.3 指标的测定
1.3.1 脑组织NF-κB的测定:3组分别于伤后8、24、72 h 3个时间点横断大鼠脊髓,取出脑组织并用4%多聚甲醛液固定后,梯度酒精脱水、二甲苯透明、浸焟,常规石蜡包埋,切片。采用免疫组化染色检测NF-κB活性。以水肿部位周围胞浆/胞核中出现棕色颗粒为阳性细胞,并测定阳性细胞的平均光密度值。
1.3.2 大鼠脑组织IL-1β水平测定:3组分别于伤后8、24、72 h3个时间点取0.2 ml脑组织匀浆上清液和血清,采用放射免疫法测定IL-1β。
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