洪雷 魏素菊 刘巍 王俊艳 史健 姜达 刘凤玲

    ·论著·

    恩度联合紫杉醇热化疗对人胃癌SGC7901细胞株增殖抑制及凋亡影响

    洪雷 魏素菊 刘巍 王俊艳 史健 姜达 刘凤玲

    目的观察恩度联合紫杉醇热化疗对人胃癌SGC7901细胞株增殖抑制及凋亡的影响。方法取对数生长人胃癌SGC7901细胞株，分为对照组、41℃、42℃、43℃、44℃组，5组分别加入终浓度30 nmol/L、60 nmol/L、120 nmol/L、240 nmol/L、480 nmol/L紫杉醇，于水浴箱中分别水浴0.5 h、1 h、1.5 h，72 h后MTT法测定紫杉醇热化疗对SGC7901胃癌细胞株细胞抑制作用并确定最佳紫杉醇浓度及热疗温度、热作用时间。流式细胞术分别检测对照组、恩度组(15 mg/L)，紫杉醇热化疗组，恩度联合组(恩度+紫杉醇热化疗)的细胞凋亡率并进行细胞周期分析。结果随着紫杉醇浓度以及温度的提高，SGC7901细胞株的抑制率逐步升高。在紫杉醇浓度480 nmol/L、43℃作用1 h条件下，SGC7901细胞株的抑制率达到70.99%，在各组最高。细胞凋亡率在对照组、恩度组、紫杉醇热化疗组以及联合治疗组分别为0.70%、1.48%、8.56%、12.97%。细胞周期分析可见与对照组相比恩度组的增殖期(S+G2/M)细胞比例由(52.5±2.1)%下降到(42.3±2.0)%(P1 材料与方法

    1.1 主要材料与试剂 人胃癌SGC7901细胞株由河北医科大学第四医院科研中心提供。恩度(先声药业)，紫杉醇注射液(江苏扬子江药业)。DMSO(上海索莱宝生物科技有限公司)，胰蛋白酶(上海索莱宝生物科技有限公司)，胎牛血清(PAA Laboratories GmbH)，四甲基偶氮唑蓝(美国SIGMA公司)。流式细胞仪(Epics-XLⅡ型 美国BC公司)，96孔细胞培养板(NEST biotechCo.,Ltd)，低温超速离心机，紫外分光光度计。

    1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养：将人胃癌SGC7901细胞株置于pH值7.2～7.4的DMEM培养液(终浓度为：10%胎牛血清，青霉素 100 U/ml，链霉素100 U/ml)中，于37%、5%CO2饱和湿度条件下培养。倒置显微镜下观察细胞呈贴壁生长，形态良好无退化，待其铺满瓶壁70%～80%时以0.25%胰蛋白酶消化传代培养，每日换液。取对数生长期的人胃癌SGC7901细胞株，制成5×105/ml的细胞悬液备用。

    1.2.2 MTT法检测紫杉醇联合热疗对细胞增殖影响：按照温度分为41℃、42℃、43℃、44℃ 4组 ......