陈彪 屈鹏飞 贾志宇 李晓玲 杨威 张英怀

    ·论著·

    吴茱萸碱抑制涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞侵袭的实验研究

    陈彪 屈鹏飞 贾志宇 李晓玲 杨威 张英怀

    目的研究吴茱萸碱对涎腺腺样囊性癌 ACC-M 细胞侵袭的影响。方法用终浓度为0、 0.01、 0.1、 1、 10、 100 μg/ml的吴茱萸碱处理 ACC-M细胞2、4、6、8、10 h后，应用transwell小室侵袭实验检测和观察ACC-M细胞的侵袭抑制情况。结果吴茱萸碱处理组较对照组穿过上室底面膜的细胞数少，细胞数随浓度增大，时间增长基本呈递减趋势，侵袭抑制率随浓度的增大而增大，随时间的增长而增大，侵袭抑制率最高可达59.99%。结论吴茱萸碱可以抑制涎腺腺样囊性癌 ACC-M细胞侵袭。

    吴茱萸碱；涎腺腺样囊性癌；侵袭

    涎腺腺样囊性癌是最常见的恶性肿瘤之一，浸润性极强和易发生远处转移是腺样囊性癌的重要特征，因此术后复发率高，生存率也比较低[1]。目前具有抗肿瘤活性的植物有效成分受到了极大关注[2]，吴茱萸碱(evodiamine)就是其中之一,研究表明，吴茱萸碱可以诱导涎腺腺样囊性癌细胞凋亡并抑制细胞增殖[3]。但是，吴茱萸碱是否能抑制涎腺腺样囊性癌细胞的侵袭，国内外尚未见报道。

    1 材料与方法

    1.1 材料 人涎腺腺样囊性癌细胞系 ACC-M 由上海交通大学口腔颌面外科实验室提供。采用 RPMI 1640 培养基加入10% 胎牛血清和抗生素，于37℃、5% CO2恒温箱内饱和湿度培养，24～48 h传1 代，以0.04%二乙胺四乙酸二钠(EDTA)和0.25%胰蛋白酶混合液消化传代。吴茱萸碱购自中国药品生物制品检定所，纯度≥98%。用二甲基亚砜配制成100 mg/ml的储存液，储存于-20℃冰箱中。使用前用培养液稀释，培养液中加入等量二甲基亚砜作为对照组。Matrigel基质胶，购自美国BD公司(货号356234)。Transwell小室，购自美国康宁公司(货号3422)。肝细胞生长因子(HGF)，PROSPEC产品(货号CYT-244)。

    1.2 方法

    1.2.1 transwell小室侵袭实验：每一个transwell小室上室膜的底面预先铺好Matrigel基质胶 50 μl(将50 μl的微量加样器末端剪去后逐个加入)；下室内加入含有肝细胞生长因子(HGF)(化学趋化物)的细胞培养液200 μl(30 μg/200 ml)；取对数生长期(即是细胞数随时间变化成倍增长 ......