刘燕 彭海兵 王建辉 王银环 杨秀红 张连元

    ·论著·

    BQ123对大鼠肢体缺血再灌注后骨骼肌的保护机制

    刘燕 彭海兵 王建辉 王银环 杨秀红 张连元

    目的探讨大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后骨骼肌细胞损伤变化,以及内皮素A(ETA)受体拮抗剂BQ123对其保护效应的机制。方法雄性Wistar 大鼠随机分为对照组(双后肢松弛环绕橡皮圈，不阻断血流)，LIR组(结扎大鼠双后肢根部4 h，恢复血流灌注4 h)和BQ123处理组(松带前15 min给予BQ123 7μg/kg，其他操作同LIR组)，每组8只。检测肢体缺血4 h再灌注4 h后各组骨骼肌组织中一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)以及NO/ET-1、活性氧(ROS)、髓过氧化物酶(MPO)、Ca2+、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶；采用原位脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL) 检测各组腓肠肌细胞的凋亡情况。结果LIR组与对照组相比较，骨骼肌组织NO、ET-1、ROS、 MPO和Ca2+含量均增加，NO/ET-1比值减小，Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性降低，凋亡指数(AI)明显增高(P1 资料与方法

    1.1 动物、试剂及仪器 10周龄雄性Wistar大鼠24只，体重200～250 g，由河南医科大学实验动物中心提供；NO、ROS、MPO、Ca2+、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶试剂盒购于南京建成生物制品公司；ET-1试剂盒购于解放军总医院科技开发中心放免所；TUNEL试剂盒购于北京中山生物试剂公司；BO123购于美国Sigma公司。Axiovert 200蔡司光学仪器购于上海,美国产SIGMA-2M/ETM低温高速离心机。

    1.2 实验方法

    1.2.1 模型制备与分组:大鼠术前 12 h禁食，自由饮水。将实验大鼠随机分为LIR组、BQ123处理组和对照组，每组8只。LIR组：采用止血带法制作大鼠LIR模型，用橡皮圈环绕结扎大鼠双后肢根部，并经激光多普勒血流仪监测并证实血流被阻断,4 h 后松解橡皮带恢复血流灌注,再经过4 h 后放血处死动物。动物于松解肢体前30 min称重、麻醉，颈部正中切开皮肤，钝性分离左侧颈静脉并行静脉插管。BQ123处理组：操作同LIR组,松带前15 min经颈静脉滴注BQ123(7 μg/kg) ......