满一 钟良军

    ·论著·

    口腔扁平苔藓病损区细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达研究

    满一 钟良军

    目的通过对口腔扁平苔藓病变发展过程中细胞凋亡状况和凋亡相关蛋白表达的研究，探讨扁平苔藓的发病机制。方法采用免疫组化SP法，分析正常口腔黏膜上皮25例，扁平苔藓组织25例中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达水平及分布差异。结果与正常黏膜比较，Bcl-2在口扁平苔藓固有层与上皮层均显过度表达(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择中国石油天然气集团公司中心医院2006年11月至2009年3月收集的石蜡切片共50例。口腔扁平苔藓25例，包括非糜烂型15例和糜烂型10例，男9例，女16例；年龄31～77岁，平均年龄(39±9)岁；选取同期正常口腔黏膜25例，男11例，女14例；年龄38～77岁，平均年龄(49±16)岁。 所有检材诊断和组织学分型均依据WHO标准[1]，由同一名经验丰富的病理医生完成。

    1.2 试剂 所有试剂均购至福州迈新生物技术有限公司。Bcl-2、Bax为即用型鼠抗人单克隆抗体，SP复合物MaxVisionTM为快捷即用型。DAB显色试剂盒为链霉亲和素-辣根过氧化物酶(HPR)免疫组化染色EnVision系统，适用于链霉素-过氧化物酶免疫组织化学染色方法(streptavidin-peroxidase,SP)。

    1.3 实验方法 采用免疫组化SP法染色检测细胞凋亡与增殖状况。所有组织切片经10%甲醛固定、常规脱蜡、透明、浸蜡、石蜡包埋。5 μm连续切片，固定于经多聚赖氨酸处理的载玻片上，常规组织切片脱蜡入水；微波加热10 min暴露抗原；3%H2O2溶液阻断内源性过氧化物酶活性10 min，PBS水冲洗，滴加Bcl-2(按比例稀释1∶80)、Bax一抗(稀释度1∶80)，37℃孵育60 min，加入SP复合物HRP-MarVisionTM，30℃孵育60 min ......