郭建美

    穹窿下器(subfornical organ，SFO)是感受性室周器官之一，缺乏血脑屏障，研究证实其与饮水、血压等多方面的调节有关[1]。穹窿下器内含有一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，NOS)阳性神经元，而一氧化氮是血压调节的重要信息分子之一，其在神经系统中含量丰富，且与高血压的发生密切相关[2]。有研究显示，NO缺乏可能是高血压发生的原因之一[3]。本文用ABC免疫细胞化学方法，观察高血压大鼠SFO内神经元型NOS(nNOS)阳性神经元的变化，探讨SFO内nNOS免疫阳性神经元在高血压形成和发展过程中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 动物模型制备 选择雌性Wistar大鼠(清洁级，体重230～250 g，由河北医科大学动物中心提供)40只，随机分为2组，实验组(n=30)和对照组(n=10)。实验组予以左旋硝基精氨酸(L-NNA)15 mg·d-1·kg-1，分别于上午 8∶00、下午 8∶00 两次腹腔注射，制备高血压动物模型。实验组根据动物血压及腹腔注射时间分为3组:用药2周组、用药4周组和用药8周组，每组10只。对照组不做任何处理。

    1.2 动物血压的测量[4]应用大鼠生理记录仪采用尾部套囊的方法测量收缩期血压。测定条件:环境安静，温度30℃，测量前将大鼠放入暖箱中使其身体暖和并适应其环境15～30 min，到时间后将大鼠取出放入鼠袋中留出全部鼠尾，并放入仪器中固定位置，在尾根部套入环式气囊，进行血压测定并读取数据。必须在大鼠安静状态下测定3次，取其平均值。适应性喂养期间每隔1 d测血压1次，主要目的是使大鼠适应实验环境。分组后每周测血压1次。

    1.3 高血压的评判标准 目前国际上还没有大鼠动态血压正常值及高血压的统一标准，根据美国和欧洲最新公布的高血压治疗新指南[5](JNC-T指南和ESH/ESC指南)及张维忠等[6]建议的动态血压暂时参考标准，本研究规定大鼠动态血压的收缩压/舒张压符合白昼 >150/100 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)，夜间 >140/90 mm Hg时为高血压。

    1.4 光镜样品制备 实验动物给予10%水合氯醛按0.3 ml/100 g体重麻醉后 ......