董玉飞 赵纪维 李海娜 杨敬芳 许丽枫

    葡萄球菌在自然界分布广泛，主要寄生在哺乳动物和鸟类的皮肤、皮脂腺和黏膜。金黄色葡萄球菌致病力较强，常引起各种化脓性感染。由凝固酶阴性葡萄球菌引起的感染发病率也逐年增高，如表皮葡萄球菌为重要的机会致病菌和院内感染重要的病原菌[1]。医院环境中分布葡萄球菌属细菌在一定条件下可以成为致病菌，引起院内感染，或标本采集不当时污染细菌培养标本，了解医院环境中葡萄球菌分布及耐药性可为判断院内感染和分析临床细菌培养结果提供参考。从而为合理使用抗生素提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 菌株来源 分离本院2010年3月至2011年10月医院环境采样标本中的葡萄球菌属细菌210株，其中金黄色葡萄球菌16株，表皮葡萄球菌162株，其他凝固酶阴性葡萄球菌32株。用金黄色葡萄球菌ATCC25923做纸片法药敏试验质控菌株。

    1.2 材料MH琼脂购自杭州天和微生物试剂有限公司，红霉素、克林霉素、头孢西丁等药敏纸片购于温州康泰生物科技有限公司，葡萄球菌鉴定卡是bioMerieux sa公司产品，ATCC25923是卫生部北京医院惠赠。

    1.3 方法

    1.3.1 菌株分离与鉴定:按照医院环境采样标准采集医院环境标本，常规操作菌落计数后，分离其中所有可疑葡萄球菌到血平板，进一步分离分纯，采用ATB Expression鉴定系统及其配套鉴定卡32 staph鉴定到种。

    1.3.2 MH平板制备:按照说明书要求称量干粉溶于蒸馏水中加热溶解后，121℃高压15 min，45℃水浴平衡后，取一次性无菌培养皿在超净工作台中水平仪上每平皿注入24 ml，冷却待用。

    1.3.3 药敏试验:采用k-b琼脂扩散法检测红霉素15 μg、克林霉素2 μg、头孢西丁30 μg耐药性，试验方法及结果判读按照CLSI2010M100-S20执行。红霉素抑菌圈≥23敏感，14-22中介，≤13耐药。克林霉素≥21敏感，15-20中介，≤14耐药。金黄色葡萄球菌和路邓葡萄球菌头孢西丁30 μg≤21为MRS ......