淫羊藿配合髓芯减压术治疗兔激素性股骨头坏死的实验研究
骨组织,成骨细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
刘志国 马文海 李杰股骨头坏死(femoral head necrosis)是由不同病因引起的股骨头活力成分死亡的病理过程,临床以髋关节疼痛、功能障碍为主要症状。该病起病隐匿,病程长,预后差,一旦发生塌陷,多发展为髋关节的退行性关节病,是骨科治疗上的疑难重症。激素性股骨头坏死(steroid-induced femoral head necrosis)是肾上腺皮质类固醇药物性股骨头坏死的简称,为非创伤性股骨头坏死中最为常见的类型,随着临床大量激素药物的应用,其发病率呈逐年升高的趋势。目前,手术与中医药治疗各有利弊,探讨如何将西医手术和中医药的治疗优势有机结合,寻求一种疗效确切,费用低廉,副作用少的综合疗法,对于提高治疗激素性股骨头坏死的疗效,减轻患者和社会经济负担具有重要意义。本研究应用中药淫羊藿配合髓芯减压术治疗动物激素性股骨头坏死,观察该疗法对股骨头骨组织再生的影响,揭示其治疗激素性股骨头坏死的机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物 纯种健康成年雄性新西兰大白兔60只,年龄5~6个月,体重2.5~3.5 kg,由白求恩国际和平医院动物实验室提供[批号:SYXK-(军)2012-017],屏蔽环境饲养。
1.2 主要仪器及试剂 马血清(北京元亨圣马生物技术研究所),甲基强的松龙(美国辉瑞生物制药公司),中药淫羊藿成品(贵州同仁堂药业有限公司),Trizol试剂、RIPA裂解液、BCA蛋白定量试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司),PCR引物(上海生工),逆转录试剂盒(MBI Fermentas公司),兔抗BMP-2多克隆抗体和兔抗IGF1多克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司),辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG抗体(sigma公司,美国),OMNI TH组织均质仪(美国OMNI公司),PCR仪(德国Effendorf公司),水平电泳仪(美国Bio-Rad公司),垂直电泳仪(北京市六一仪器厂),半干电转仪(北京君意东方电泳设备有限公司),柯达计算机X线摄影成像系统(900 CR),Lunar prodigy型双能X线骨密度仪(美国GE公司),INSTRON 5544材料性能实验机(美国instron公司)。
1.3 方法
1.3.1 动物模型制作及分组:将动物随机分为对照组(n=12)和模型组(n=48)。按照Wang等[1]造模方法造模,兔耳缘静脉注射马血清10 ml/kg,间隔3周后,马血清量减为6 ml/kg,经兔耳缘静脉再次注射,间隔2周后,腹腔注射甲基强的松龙45 mg/kg ......
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