管晨峰 路伟 张开礼 郭见 潘一峰 黄国栋

    神经生长因子(nerve growth factor，NGF)在损伤神经再生和功能修复过程中发挥重要作用。然而，NGF难以通过血脑屏障，使其在给药的途径和方式上存在技术上的难题。纳米柔性脂质体具有高度的变形性，它能穿过直径为其1/10的小孔。本研究采用薄膜-超声法制备载NGF纳米柔性脂质体，并对制备条件和稳定性进行研究。

    1 材料与方法

    1.1 仪器RE-52旋转蒸发器(上海青浦沪西仪器厂);WH-2微型漩涡混合仪(上海沪西分析仪器厂);超声破碎乳化仪;SHZ-Ⅲ型循环水真空泵(上海亚荣生化仪器厂);Zetasizer激光粒度分析仪(英国马尔文公司)。

    1.2 主要试剂 葡聚糖凝胶G-50(上海伯奥生物科技有限公司);卵磷脂、胆固醇、胆酸钠(国药集团化学试剂有限公司);NGF(厦门北大之路生物工程有限公司)。

    1.3 载NGF纳米柔性脂质体的制备 定量称取卵磷脂、胆固醇、NGF于圆底烧瓶中，加入10 ml氯仿-甲醇复合溶剂于混合仪上充分溶解后，于37℃恒温水浴中旋转减压蒸发去除有机溶剂，形成均匀类脂薄膜，以氮气吹干残余溶剂。再加入含有定量胆酸钠的水和介质溶液10 ml至烧瓶中，旋转洗膜1 h，使脂质膜充分溶胀水化，得到脂质体混悬液。将上述脂质体混悬液置于冰水浴中探针式间断超声，室温静置后用0.2 μm微孔滤膜过滤除去超声时探头所释放的金属颗粒等杂质。氮气密封，4℃冷藏保存。

    1.4 载NGF纳米柔性脂质体包封率测定 取适量的载NGF纳米柔性脂质体，加5%Tri-ton X-100乙醇溶液2 ml破乳，再加入5 ml磷酸盐缓冲液充分混匀 ......