康利鸽 何雪辉 田春凤 李昕 刘兰英

    研究表明，促红细胞生成素(EPO)可对心肌损伤产生保护作用，并可抑制心室重构，但其确切的机制尚不清除[1，2]。本实验建立大鼠心肌缺血再灌注模型，观察EPO对急性心肌缺血再灌注心肌凋忘基因表达的影响，探讨EPO的心脏保护机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 健康雄性Sprague Dawley大鼠36只，清洁极，12～15周龄，体重210～260 g，由河北医科大学实验动物中心提供，按清洁极大鼠的要求饲养，自由进食水。

    1.2 方法 通过阻断左冠状动脉前降支血流建立缺血再灌注模型。大鼠称重，经10%水合氯醛麻醉(3.0 ml/kg腹腔内注射)。经口气管插管接小动物呼吸机，潮气量约为30 ml，通气频率90次/min。去前胸正中切口，在3～4肋间进入胸腔，分离心包，从剑突下方向胸腔方向从两侧胸壁后方向上方适度挤压，使心脏跳出胸腔，在右心室流出道与左心房之间，据主动脉根部2 mm处用丝线(6-0)穿过左冠状动脉前降支，用线管法阻断冠脉血流。阻断后显示左心室壁变白，并出现室壁变白，心电图I、avL导联S-T段明显抬高(>1 mV)，表明阻断成功，45 min后，松开丝线实施再灌注，保留丝线，逐层缝合，自主呼吸平稳后，撤掉呼吸机，拔出气管插管。假手术组(Sham组)只穿线绕过冠状动脉前降支而不阻断血流。术后大鼠保温，单笼放置，待清醒后再次称重，编号，按组分笼饲养。

    1.3 分组36只大鼠随即分为3组，每组12只:(1)假手术组(Sham组):0.9%氯化钠溶液1 ml，直接腹腔注射，1次/d，共3 d。(2)缺血再灌注组(IR组):0.9%氯化钠溶液腹腔注射，1次/d，手术前连续3 d。(3)EOP组:EPO以3 000 U/kg直接腹腔注射，1次/d，手术前连续前3 d(济脉欣，河北省石家庄市华北制药厂生产)。

    1.4 取材

    1.4.1 染色:大鼠麻醉后迅速开胸，结扎保留丝线后，从下腔静脉注入伊文氏蓝2 ml。并静脉注射10%氯化钾溶液使心脏停跳于舒张末期，取出心脏，在4℃经高压处理的DEPC水中洗去残余血液 ......